Pesquisa de Mycobacterium leprae em biópsias de mucosa oral por meio da reação em cadeia da polimerase / Molecular detection of Mycobacterium leprae by polymerase chain reaction in oral mucosa biopsy specimens

RESUMO

FUNDAMENTOS - A hanseníase é endêmica na América do Sul, sendo responsável por 3 por cento do total dos casos mundiais e, particularmente, no Brasil, por 85 por cento dos casos sul-americanos. Seu agente pode ser encontrado na mucosa oral sem qualquer alteração evidente, e apenas testes laboratoriais muito sensíveis podem detectar sua presença. OBJETIVOS - Determinar se o genoma do Mycobacterium leprae pode ser encontrado pelo teste da PCR em biópsias com punch da mucosa oral de pacientes com hanseníase. MATERIAL E MÉTODOS - Realizou-se biópsia da mucosa oral normal de sete pacientes com hanseníase multibacilar. Cinco estavam em tratamento durante o estudo, e apenas um, ainda sem tratamento, teve o diagnóstico confirmado pela hematoxilina-eosina e coloração de Fite-Faraco para M. leprae. As peças foram incluídas em parafina e submetidas à PCR para pesquisa de M. leprae. RESULTADOS - Seis dos sete casos foram positivos para M. leprae, e um para Mycobacterium sp., demonstrando-se alta sensibilidade e especificidade do método. CONCLUSÃO - A PCR é método rápido, fácil e confiável para a investigação de rotina da infecção por micobactéria, mesmo quando a doença ainda é assintomática. O diagnóstico pode ser obtido a partir de simples biópsia ambulatorial.

ABSTRACT

BACKGROUND - Hansen's disease is endemic in South America, which accounts for 3 percent of total world cases, and particularly in Brazil, which accounts for 85 percent of all South American cases. The bacteria can be found in the oral mucosa with no evident signs of infection, and only very sensitive laboratory assays can detect its presence. OBJECTIVES - The aim of this study was to ascertain if the M. leprae genome can be detected by PCR in small punch biopsy specimens from the oral mucosa of patients with Hansen's disease. METHODS - The normal oral mucosas of seven multibacillary Hansen's disease patients were biopsied. Five of them were under treatment at the time of the study. Diagnosis of Hansen's disease could be determined by conventional hematoxylineosin and Fite-Faraco staining for M. leprae in only one patient. This patient had not received treatment prior to the time of the biopsy. The paraffin embedded specimens were submitted to PCR for M. leprae. RESULTS - Six out of seven cases showed positivity for M. leprae, and the remaining case showed positivity for Mycobacterium sp., demonstrating the high sensitivity and specificity of this method. CONCLUSIONS - PCR is a fast, easy and reliable method for routine investigation of mycobacterial infection, even during nonsymptomatic periods. Diagnosis can be achieved through a simple oral biopsy at an outpatient clinic.