Detecção e rastreamento de mutações no proto-oncogene rET em pacientes com neoplasia endócrina múltipla tipo 2 por meio de eletroforese em gel sensível à conformação / RET prot-oncogene mutations screening and detection in patients with multiple endocrine neoplasia type 2 using conformation sensitive gel electrophoresis

RESUMO

A neoplasia endócrina múltipla tipo 2 é uma síndrome tumoral hereditária, onde o RET apresenta mutações germinativas causadoras da patologia. Com o diagnóstico genético, a tireoidectomia total tornou-se curativa para indivíduos assintomáticos portadores de mutações. Nosso objetivo é validar a metodologia de eletroforese em gel sensível à conformação (CSGE) no rastreamento de mutações do RET, comparativamente ao polimorfismo conformacional de cadeia simples (SSCP) e seqüenciamento genético em famílias portadoras das mutações Cys620Arg (NEM-2A + HSCR e CMT-F); Cys634Arg (NEM-2A); Cys634Tyr (CMT-F); Val648Ile (NEM-2A); Val804Met (CMT-F) e Met918Thr (NEM-2B). Os polimorfismos rastreados foram Gly691Ser, Leu769Leu e Ser904Ser. Ambas metodologias de rastreamento demonstraram-se sensíveis para alterações genéticas do RET exceto para a mutação Val804Met e polimorfismo Ser904Ser.

ABSTRACT

Multiple endocrine neoplasia type 2 (MEN-2) is inherited tumor syndrome, presenting RET germline mutations as causing-disease. With genetic diagnosis, prophylactic total thyroidectomy became curative for asymptomatic individuals carrying RET mutations. Our objective is to validate conformation sensitive gel electrophoresis (CSGE) methodology for RET genetic screening mutation, comparatively to single-strand conformation polymorphism (SSCP) and automatic sequencing in mutations carrying families Cys620Arg (MEN-2A + HSCR and FMTC); Cys634Arg (MEN-2A); Cys634Tyr (FMTC); Val648Ile (MEN-2A); Val804Met (FMTC) and Met918Thr (MEN-2B). Polymorphisms were also screened Gly691Ser, Leu769Leu and Ser904Ser. Both screening methodologies were sensible for RET genetic alterations except for Val804Met mutation and Ser904Ser polymorphism.