Immunoblotting para diagnóstico de toxocarosis humana en un área subtropical / Immunoblotting for the diagnosis of human toxocarosis in a subtropical area

ABSTRACT

The diagnosis of toxocarosis is based upon the demonstration of antibodies by ELISA methods, although cross-reaction with other ascarids may occur in populations from tropical areas. For this reason, some authors proposed western blotting as a confirmatory test. The aim of this work was to develop an immunoblotting in simpler technical conditions and to compare results with the ELISA test. With this purpose sera from adults and children with sign and/or symptoms of toxocarosis and living in the metropolitan area of Resistencia city (Northeast of Argentina) were studied. ELISA test was performed and 120 positives and 60 negatives sera were selected and analyzed again by immunoblotting. Positive samples and controls showed a WB pattern with six bands of 67.6 kDa, 55.6 kDa, 43.9 kDa, 32.4 kDa, 26.6 kDa and 23.4 kDa, while negative controls from endemic and non-endemic areas of toxocarosis showed no bands. Out of the 180 samples studied, in 172 coincident results for both methods were obtained (95.6%), 6 ELISA negative samples were positive for WB (3.3%) and 2 ELISA positive samples resulted negative in the WB (1.1%). The immunoblotting technique described in this work may constitute an adequate method for the diagnosis of toxocarosis in subtropical areas, particularly useful in cases with negative or low-titers ELISA test results and with signs or symptoms of the infection.

RESUMEN

El diagnóstico de toxocariosis se basa en la demostración de anticuerpos mediante enzimo-inmunoensayos, aunque en poblaciones de área tropicales suelen ocurrir reacciones cruzadas con otros ascáridos. Por ello algunos autores han propuesto el Western Blot como test confirmatorio. El objetivo de este trabajo fue desarrollar un método de immunoblotting con condiciones técnicas sencillas y comparar su comportamiento con la reacción de enzimoinmunoensayo. Se estudiaron 180 muestras de suero de adultos y niños con signo-sintomatología compatible con toxocariosis. Se efectuó test de ELISA con Antígenos TES, seleccionándose 120 sueros positivos y 60 negativos, los que fueron analizados nuevamente por immunobloting y se compararon los resultados de ambos métodos. Las muestras y controles positivos mostraron en el WB un patrón de seis bandas con PMs de 67,6 kDa, 55,6 kDa, 43,9 kDa, 32,4 kDa, 26,6 kDa y 23,4 kDa. Los sueros de control negativo de área endémica y no endémica de toxocarosis no mostraron banda alguna. De 180 muestras estudiadas, en 172 se obtuvieron resultados coincidentes por ambos métodos (95,6%), 6 muestras negativas por ELISA resultaron positivas por Western Blot (3,3%) y dos muestras positivas por ELISA fueron negativas por Western Blot (1,1%). El ensayo de immunoblotting acá descrito constituiría un método adecuado para el diagnóstico de toxocariosis en áreas sub-tropicales, particularmente útil en los casos en los que el test de ELISA resulte negativo o positivo con títulos bajos y en presencia de signos y/o síntomas de la infección.