Implementación de un método fluorométrico para evaluación de actividad anti transcriptasa reversa del virus VIH-1 / Implementation of a fluorometric method for the anti HIV-1 virus reverse transcriptase activity evaluation
Rev. colomb. ciencias quim. farm
;
34(1): 92-100, jun. 2005.
Article
in Spanish
| LILACS
| ID: lil-463841
RESUMEN
Se implementó una prueba de tamizaje preliminar para evaluar la potencial inhibición ejercida por productos de origen natural y sintético sobre la actividad de la proteína Transcriptasa Reversa del virus VIH-1, en respuesta a la necesidad de disponer de un ensayo in vitro no radioactivo, relativamente rápido, que arroje resultados válidos, con costos moderados, bioseguro y de fácil acceso. Esta prueba se basa en la capacidad que tiene la proteína transcriptasa reversa viral para formar DNA de cadena sencilla (cDNA) a partir de RNA, utilizando deoxinucleótidos trifosfatados (dNTPs), proceso conocido como transcripción reversa. Para detectar la actividad de la proteína se realizaron ensayos fluorométricos in vitro, usando proteína recombinante sin purificar, y nucleótidos fluorescentemente marcados (Cy3-dCTP) como parte del sustrato. Las condiciones establecidas para la actividad de la proteína fueron 5µg/reacción de RNA total y 2µg/reacción de oligo-dT12-18, reflejadas en 43.6 por ciento de incorporación del nucleótido fluoromarcado
Full text:
Available
Index:
LILACS (Americas)
Main subject:
Acquired Immunodeficiency Syndrome
/
HIV Reverse Transcriptase
/
Chemical Phenomena
Language:
Spanish
Journal:
Rev. colomb. ciencias quim. farm
Journal subject:
Pharmacy
/
Chemistry
Year:
2005
Type:
Article
Affiliation country:
Colombia
Institution/Affiliation country:
Universidad Nacional de Colombia/CO
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