Reversão do fenótipo de resistência a múltiplas drogas em células de sarcoma uterino humano: utilização de emusão lipídica como veículo de oligonucleotídeos antissenso / Reversion of the multiple drug resistance phenotype in a human sarcomacell line: lipid emulsion as antisense oligonucleotide vector

RESUMO

O objetivo deste trabalho foi estudar a utilização de uma nanoemulsão lipídica (LDE) como vetor de oligonucleotídeos antissenso (OAS). Foi observado que o OAS se liga à LDE, sendo a constante de ligação de 4,2 X 10-3M-1. O complexo OAS/LDE se liga ao receptor de LDL e através desta via é internalizado, pelas células de sarcoma uterino resistentes a doxorrubicina. Os OAS apresentaram após 24 horas distribuição citoplasmática e nuclear e após 48 horas, somente citoplasmática. Utilizando-se dois diferentes OAS, verificou-se que ambos foram capaz de inibir (70 por cento) a expressão do gene de resistência a múltiplas drogas após 48 horas de incubação, tornando as células mais susceptíveis à ação da doxorrubicina. Assim, o complexo OAS/LDE é um sistema potencialmente promissor para ser utilizado em terapia gênica.

ABSTRACT

The objective of this study was to evaluate the usefulness of a nanolipid emulsion (LDE) as a vector to carry antisense olligonucleotide (OAS). We have observed that LDE was able to bind to the OAS; the binding constant was 4,2 X 10-3M-1. The complex was shown to bind to LDL receptors and then been internalized into a human sarcoma cell line resistant to doxirrubicine. After 24 hours the complex have shown citoplasmatic and nuclear distribution, after 48 hours only citoplasmatic distribution was observed. Two OAS were used. Both OAS strongly inhibited (by 70 per cent) the cell MDR-1 gene expression after 48 hours of incubation and cells turned out to be more susceptible to doxorrubicine action. Therefore, OAS/LDE is promising complex to be used in gene therapy studies.