Effect of different extracts from the Brazilian Atlantic Forest on the Pdr5p ATPase activity / Efeito de extratos de plantas da Floresta Atlântica Brasileira sobre a atividade da Pdr5p ATPase

ABSTRACT

In the current study, we tested the effect of 27 plant extracts and fractions from different botanical families on the activity of Pdr5p from yeast plasma membrane, responsible for the multidrug resistance phenotype in yeast cells. Some of the extracts were able to produce a good inhibition in the fixed concentration (200 µg/mL) and were selected for a deeper investigation. Dose-response curves were obtained for the crude ethanol extracts of Bathysa australis (A. St.-Hill.) Benth. & Hook f., Mabea fistulifera Mart. and Virola oleifera (Schott) A. C. Sm. with concentrations ranging up to 400 µg/mL. The lower IC50 value was obtained for Virola oleifera, 22.8 µg/mL, followed by Bathysa australis, 35.3 µg/mL, and Mabea fistulifera, 42.5 µg/mL. After fractionation of the crude extracts by liquid-liquid partition with different organic solvents and each fraction was tested again, only some of the fractions retained the ability to inhibit the enzymatic activity. When analyzed by HPLC/DAD, the active fractions showed the presence of flavonoid derivatives, already reported for their ability to inhibit Pdr5p ATPase activity, as well as other classes of secondary metabolites such as lignans and alkaloids.

RESUMO

No presente estudo, testamos o efeito de 27 extratos e frações de plantas de diferentes famílias botânicas sobre a atividade da proteína Pdr5p de membranas plasmáticas de leveduras, responsável pelo fenótipo de resistência a múltiplas drogas em leveduras. Alguns dos extratos foram capazes de produzir uma boa inibição na concentração fixa de 200 µg/mL e foram selecionados para uma investigação mais aprofundada. Curvas de dose-resposta foram obtidas para os extratos brutos etanólicos de Bathysa australis (A. St.-Hill.) Benth. & Hook f., Mabea fistulifera Mart. e Virola oleifera (Schott) A. C. Sm., com concentrações até 400 µg/mL. O menor valor de IC50 foi obtido para Virola oleifera, 22,8 µg/mL, seguido por Bathysa australis, 35,3 µg/mL e Mabea fistulifera, 42,5 µg/mL. Após o fracionamento dos extratos brutos por partição líquido-líquido com diferentes solventes orgânicos, cada fração foi novamente testada, sendo que apenas algumas das frações mantiveram a habilidade de inibir a atividade enzimática. Quando analisadas por HPLC/DAD, as frações ativas demonstraram a presença de derivados de flavonóides, que já demonstraram ter a habilidade de inibir a atividade ATPasica da Pdr5p, assim como outras classes de metabólitos secundários, tais como lignanas e alcalóides.