Expressão de componentes de matriz extracelular durante a infecção experimental de cardiomiócitos pelo Trypanosoma cruzi e sua regulação por TGF-beta e TNF-alfa / Expression of components of extracellular matrix during the experimental infection of cardiomyocytes for the trypanosoma cruzi and its regulation of TGF-beta and TNF-alfa

RESUMO

Componentes de matriz extracelular têm importante papel na patologia da doença de Chagas, podendo participar do processo de invasão do Trypanosoma cruzi ou acumular-se progressivamente no tecido cardíaco, levando à fibrose que ocorre em concomitância com a miocardite chagásica. Citocinas secretadas durante a inflamação podem funcionar como mediadoras do processo fibrótico. No entanto, os mecanismos reguladores da fibrose chagásica ainda precisam ser bem esclarecidos. Ensaios de interação T. cruzi - cardiomiócito in vitro revelaram a participação da seqüência RGD de fibronectina (FN) no processo de invasão. A análise histopatológica do miocárdio de camundongos Suíços infectados pelo T. cruzi, cepa Y, revelou a presença de intensos infiltrados inflamatórios na fase aguda da infecção experimental, enquanto animais infectados com T. cruzi, clone Dm28c, não apresentaram miocardite. Um aumento nos depósitos de FN, laminina (LM) e colágeno IV detectados por imunofluorescência indireta foi revelado apenas no miocárdio de animais infectados com T. cruzi cepa Y, mas não com Dm28c. Por outro lado, a análise da interação T. cruzi-cardiomiócito in vitro demonstrou redução na expressão de FN em cardiomiócitos altamente infectados, enquanto a LM apresentou somente alterações em sua distribuição. O tratamento das culturas de cardiomiócitos com TGF-beta e TNF-alfa provocou aumento generalizado na expressão de matriz de FN, mas não alterou a expressão de LM. A análise das imagens de culturas de cardiomiócitos infectados pelo T. cruzi (72h) com o programa KS400 revelou baixa superposição de FN com células altamente infectadas, mesmo após o tratamento com citocinas. Este evento parece estar relacionado com a quebra de miofibrilas decorrente da infecção, uma vez que o tratamento de cardiomiócitos com citocalasina D, droga que despolimeriza filamentos de actina, resultou em uma desestruturação similar das fibrilas de FN independente da presença de citocinas. A adição de...