Effects of topical 0.2 percent Cyclosporine A on corneal neovascularization induced by xenologous amniotic membrane implantation into a corneal stroma micropocket of rats / Efeitos do uso tópico da Ciclosporina A (CsA) 0,2 por cento na neovascularização corneal induzida pelo implante de membrana amniótica xenógena em microbolsa no estroma da córnea de ratos

ABSTRACT

The objective of the study was to evaluate the topical effects of 0.2 percent Cyclosporine A (CsA) on corneal neovascularization of rats following surgical implantation of equine amniotic membrane into a corneal stroma micropocket. The implantation of xenologous amniotic membrane was performed bilaterally in 90 rats. In the same day of the surgery each right eye started receiving topical CsA twice a day. The left eye received no medication and served as a control. The evaluation of corneal neovascularization was performed by computerized image analysis and histopathological evaluation at 1, 3, 7, 15, 30 and 60 days postoperatively. For the image analysis 10 animals were used per time period, and for the histopathological examination, five animals were used per time period. Image analysis found that corneal neovascularization began on the 3rd postoperative day, reached its peak on the 7th day, and then progressively and rapidly decreased. Statistic analysis indicated that neovascularization of the CsA treated eye on the 7th day was significantly higher than that observed in untreated eyes. On the 30th day, however, this pattern was reversed with the neovascularization observed in the CsA treated eyes declining to the low levels observed on the 3rd day. The degree of neovascularization in the untreated eyes on the 30th day declined to the baseline levels found on day 3 at the 60th day. Histopathological analysis indicated that deposition of collagen in the implanted tissue was completed by the 15th day. Therefore, we concluded that (1) equine amniotic membrane in rat corneal stroma produced an intense neovascularization until the 15th day postoperatively and then regressed, (2) deposition of collagen of the implanted tissue was completed on the 15th day postoperatively, and (3) use of CsA was associated with increase in the corneal neovascularization initially, followed by a quick and intense regression.

RESUMO

Este estudo teve como objetivo a avaliação dos efeitos tópicos da Ciclosporina a 0,2 por cento (CsA) sobre a neovascularização corneana de ratos após implante cirúrgico de membrana amniótica eqüina em microbolsa do estroma corneana. O implante da membrana foi feito bilateralmente em 90 ratos. O tratamento com CsA iniciou-se no mesmo dia da cirurgia, nos olhos direitos dos animais, duas vezes ao dia. Os olhos esquerdos não receberam nenhum tratamento e serviram de controle. A avaliação da neovascularização corneana foi feita por análise de imagem computadorizada e por exame histopatológico aos dias 1, 3, 7, 15, 30 e 60 de pós-cirúrgico. Para a análise de imagem foram utilizados 10 animais por período, e para o exame histopatológico, 5 por período. A análise de imagem demonstrou que a neovascularização iniciou-se no 3º dia pós-cirúrgico, alcançou seu pico no 7º dia e então regrediu rápida e progressivamente até o 60º dia. A análise estatística indicou que a neovascularização no 7º dia nos olhos tratados com CsA foi significantemente mais acentuada do que aquela observada nos olhos não tratados. Entretanto, no 30º dia este fato se reverteu, e a neovascularização observada nos olhos tratados com CsA diminuíra a níveis baixos comparáveis àquela do 3º dia. Já nos olhos não tratados, o grau de neovascularização somente pôde ser comparado àquele nível básico encontrado no 3º dia aos 60 dias de pós-operatório. A análise histopatológica demonstrou que a deposição de colágeno no tecido implantado se completou no 15º dia. Desta maneira, foi possível concluir que (1) a membrana amniótica em estroma corneano de ratos produz intensa neovascularização até o 15º dia de pós-operatório com posterior regressão, (2) a deposição de colágeno do tecido implantado foi completa ao 15º dia de pós-operatório, e que (3) o uso de CsA esteve associado com aumento inicial da neovascularização corneana, seguido de rápida e intensa regressão.