Ca(OH)2 action on TNF-alpha and NO release in macrophage culture stimulated by Pseudomonas aeruginosa LPS / Ação do Ca(OH)2 sobre a produção de TNF-alfa e NO de cultura de macrófagos estimulada por LPS de Pseudomonas aeruginosa
Rev. odonto ciênc
;
23(3): 225-228, jul.-set. 2008. tab
Article
in English
| LILACS, BBO
| ID: lil-494940
ABSTRACT
Purpose:
Calcium hydroxide [Ca(OH)2] interaction with the immune system to destroy or neutralize bacteria and their by-products is not completely understood. This study evaluated the calcium hydroxide ability to neutralize Pseudomonas aeruginosa lipopolysaccharides (LPS) using two differentmethods:
nitric oxide (NO) stimulation and Tumoral Necrosis Factor-alpha (TNF-alpha) release in mice macrophage culture.Methods:
For the NO assay, peritoneal exudate cells (PECs) were placed in contact with 25ìg/mL and 50ìg/mL LPS and LPS/Ca(OH)2 suspensions (50ìg/25mg and 25ìg/25mg). After incubation for 8h, Griess reagent was used, and the NO release was quantified. In the TNF-alpha assay the LPS solution was tested in 25ìg/mL, and the LPS/Ca(OH)2 suspension was tested in 25ìg/25mg concentration. After incubation for 24 hours, cells were fixed and stained with crystal violet. Absorbance values were obtained. Results were expressed in micromols. All tests were performed in triplicate.Results:
The presence of Ca(OH)2 in both tested concentrations significantly reduced NO and TNF-alpha release.Conclusion:
It can be concluded that bacteria LPS is a strong stimulus for NO and TNF-alpha release, but calcium hydroxide can neutralize it.RESUMO
Objetivo:
A ação do hidróxido de cálcio [Ca(OH)2] com o sistema imune e o mecanismo de neutralização das bactérias e seus subprodutos ainda não foi completamente esclarecida. Neste estudo foi avaliada a capacidade do Ca(OH)2 em neutralizar o lipopolissacarídeo (LPS) de Pseudomonas aeruginosa, utilizando-se duas metodologias liberação de Óxido Nítrico (NO) e Fator de Necrose Tumoral Alfa (TNF-alfa) em cultura de macrófagos peritoneais de camundongos.Metodologia:
No ensaio do NO, as células peritoneais foram expostas a uma solução de LPS (25mg/mL e 50mg/mL); e à suspensão de LPS/Ca(OH)2 em duas concentrações (50mg/ 25mg e 25mg/25mg). Após 8 horas de incubação, foi utilizado reagente de Griess, e a liberação de NO foi quantificada. No ensaio do TNF-alfa, a solução de LPS foi usada na concentração de 25mg/mL e o LPS/Ca(OH)2 a 25mg/25mg. Após 24 horas, as células foram fixadas e coradas com cristal violeta, e os valores de absorbância foram obtidos. Os resultados foram expressos em micromols. Todos os testes foram realizados em triplicata.Resultados:
A presença de Ca(OH)2 nas duas concentrações avaliadas reduziu significativamente a liberação de NO e TNF-alfa.Conclusão:
Pode-se concluir que o LPS bacteriano representa um forte estímulo para liberação destas citocinas, mas o hidróxido de cálcio foi capaz de neutralizar este efeito.
Full text:
Available
Index:
LILACS (Americas)
Main subject:
Pseudomonas aeruginosa
/
Calcium Hydroxide
/
Lipopolysaccharides
/
Tumor Necrosis Factor-alpha
/
Macrophages, Peritoneal
/
Nitric Oxide
Type of study:
Evaluation studies
Limits:
Animals
Language:
English
Journal:
Rev. odonto ciênc
Journal subject:
Dentistry
Year:
2008
Type:
Article
Affiliation country:
Brazil
Institution/Affiliation country:
UNESP/BR
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