Fijación de bromosulfataleina a hepatócitos aislados de rata / Binding of sulfobromophthalein to hepatocytes isolated from rats

RESUMEN

En este trabajo se caracteriza el proceso de fijación de BSF a hepatocitos aislados a través del análisis del efecto del reemplazo de los iones del medio sobre el mismo. Las celulas fueron obtenidas por el método de perfusión hepática con colagenasa. La viabilidad celular fue determinada por exclusión de Azul Tripán (82ñ2%) y retención de la lacticodeshidrogenasa (81ñ2%). Se suspendieron hepatocitos (0,1-0,4x10**6 cél/ml), en una solución de BSF (2micronM) de constitución NaCl (150mM), KCl (5mM), glucosa (5mM), Hepes (5mM), pH 7,5 (medio de control. Se reemplazaron el NaCl y KCl por las sales respectivas de Br-, NO-3, I-, F-, o Li+, Rb+, Cs+ o se sustituyeron isoosmóticamente todos los iones por manitol (medios de prueba). Luego de 28seg de contacto de las células con los medios respectivos, a 4-C, se separaron por centrifugación y se determinó la concentración de BSF en el sobrenadante. La cantidad promedio de BSF asociada a los hepatocitos fue 1,89ñ0,13nmolesx10-6 cél. (n41). El proceso se redujo significativamente al alcanzar la fuerza iónica valores de 0,04M y alcanzó el 50% del valor de fijación control con el reemplazo total de los iones. En medios con reemplazo catiónico se observó incremento de los asociado de acuerdo con una secuencia determinada (Li+ = Na+ < Rb+ < Cs+). El proceso no fue afectado por el reemplazo aniónico a excepción del I-. Se consideró que lo estimado fue un proceso de fijación atendiendo fundamentalmente al tiempo de incubación, la temperatura y el mínimo efecto de la osmolaridad 2 sobre el mismo. Puesto que la...