Effects of mitomycin C on infiltration of polymorphonuclear leukocytes after epithelial scrape injury in the mouse cornea / Efeito da mitomicina C na infiltração de leucócitos polimorfonucleares após lesão epitelial em córnea de camundongo

ABSTRACT

PURPOSE: To determine whether mitomycin C (MMC) alters appearance and disappearance of polymorphonuclear leucocytes (PMN) in the cornea stroma, using an epithelial scrape injury in eye mouse model. METHODS: Twenty-mice underwent mechanical epithelium debridement in the central cornea using 20 percent ethanol. After the scrape, the right eye received 0.02 percent MMC for one minute, while the left eye received physiological saline. The animals were sacrificed on days 1, 2, 5, and 14 after surgery, and corneal whole mounts were prepared for histology. PMN distribution was analyzed in digitized microscope images. Cell division in the cornea was determined by immunohistochemical detection of bromodeoxyuridine (BrdU), which was injected intraperitoneally before the mice were sacrificed. RESULTS: Epithelial scrape injury triggered infiltration of PMNs into the corneal stroma. An analysis of PMN distribution revealed that there was no difference between eyes treated with and without MMC at all time points. BrdU labeling showed that 0.02 percent MMC for one minute blocked keratocyte proliferation completely. CONCLUSION: MMC treatment regimen, which is common in clinical practice, inhibits keratocyte proliferation during wound healing, but when used at 0.02 percent for one minute, it does not affect PMN infiltration into the corneal stroma, and subsequent movement toward the injury site, or the disappearance of PMNs from the stroma, in the mouse epithelial injury model.

RESUMO

OBJETIVO: O objetivo do estudo foi determinar se a mitomicina C (MMC) altera o aparecimento dos leucócitos polimorfonucleares (PMN) no estroma corneano após abrasão epitelial central, utilizando olhos de camundongo como modelo. MÉTODOS: Vinte camundongos foram submetidos à abrasão epitelial em córnea central utilizando etanol a 20 por cento. Após a lesão, o olho direito recebeu MMC a 0,02 por cento por 1 minuto, enquanto o olho esquerdo recebeu solução salina. Os animais foram sacrificados em 1, 2, 5 e 14 dias após a cirurgia e a córnea foi preparada para histologia. A distribuição dos PMN foi analisada e digitalizada em imagens microscópicas. A divisão celular na córnea foi detectada pela imuno-histoquímica da bromodeoxirudina (BrdU), injetada intraperitonialmente duas horas antes dos animais serem secrificados. RESULTADOS: A lesão epitelial gerou infiltração de PMN no estroma da córnea. A análise da distribuição dos PMNs revelou que não houve diferença estatisticamente significante entre os olhos tratados e não tratados com MMC, em todos os tempos estudados. O estudo com BrdU mostrou que a MMC quando utilizada a 0,02 por cento por um minuto bloqueou completamente a proliferação de ceratócitos. CONCLUSÃO: O tratamento com MMC, que é utilizada comumente na prática clínica, inibe a proliferação dos ceratócitos durante a cicatrização corneana, porém quando utilizada a 0,02 por cento por um minuto, não altera a infiltração dos PMNs dentro do estroma corneano após lesão epitelial em córneas de camundongos.