Imunidade celular na leishmaniose tegumentar americana humana: linfócitos T oriundos do sangue e da lesão estimulados in vitro por antígenos de Leishmania e de ouros protozoarios / Cellular immunity in human ATL: T lymphocytes from the blood and injury in vitro stimulated by antigens of Leishmania protozoa and diamonds

RESUMO

Foram obtidas células mononucleares das lesões (CML) e do sangue periférico (CMSP) de 40 pacientes com leishmaniose cutânea (LC), quatro com leishmaniose mucosa (LM) e quatro com leishmaniose disseminada (LDiss). As células foram caracterizadas por citofluorometria quanto ao fenótipo de linfócitos B, T, CD4+, CD8+, yo, macrófagos, receptor de IL-2 (IL-2R) e lFN-yR. As proporções de linfócitos T foram similares nos infiltrados de LC, LM e LDiss. Os percentuais de células CD4+ e CD8+ foram mais elevados nas lesões com tempo de evolução superior a três meses. Os casos de LM apresentaram percentuais mais elevados de células expressando IL-2R (X=87.2±5.2 percentil) e lFN-yR (X=81.3±6.6 percentil) quando comparados aos casos de LC e LDiss, podendo estar associado à gravidade das lesões mucosas. Foram realizados ensaios in vitro de resposta proliferativa de linfócitos (RPL) a antígenos de L. braziliensis (Ag-Lb), concanavalina A (Con-A), T. gondii (Ag-Tg) e T. cruzi (Ag-Tc). A RPL de CML a Ag-Lb foi positiva (índice de estimulação - IE ≥ 2.5 acima do controle) em 13 de 24 pacientes de LC (Δcpm 10-3=4.9±1.8). As CML de 10 em 16 pacientes de LC sororreativos ao Toxoplasma, proliferaram quando estimuladas com Ag-Tg (Δcpm 10-3=8.3±5). Por outro lado, CML de sete pacientes que não eram sororreagentes ao Toxoplasma, não proliferaram após estímulo com Ag-Tg. Apenas um paciente em 18 testados, apresentou RPL positiva (IE=3.4) a Ag-Tc. O sobrenadante destas culturas foi coletado para quantificação de citocinas do tipo 1 (IFN-y) e do tipo 2 (IL-4 e IL-5). O IFN-y foi detectado nas culturas de CML estimuladas com Con-A, Ag-Lb e Ag-Tg. Não foi detectada produção de IL-4 e IL-5 nestes sobrenadantes. O RANTES foi quantificado no sobrenadante de CML e de CMSP estimuladas com Ag-Lb. Células reativas a Ag-Lb estimuladas in vitro por quatro dias foram separadas em gradiente de Percoll e analisadas quanto ao fenótipo (CD4+ e CD8+). Os percentuais de células CD4+ e CD8+ reativas a Ag-Lb foram variáveis três pacientes apresentaram CD4+ > CD8+ e três tiveram CD8+ > CD4+. Esses dados demonstram que linfócitos T de lesões de leishmaniose são capazes de proliferar e produzir IFN-y não apenas quando estimulados com antígenos de Leishmania, mas também após estímulo com outros antígenos não relacionados à infecção (Ex.Tg). Logo, células reativas a outros antígenos também migram para as lesões de leishmaniose. O papel destas células para a cura ou agravamento da lesões ainda necessita ser determinado.