Esquitossomose mansônica hepatoesplênica humana: produção de TNF-alfa em monócitos / Hepatosplenic human schistosomiasis: TNF-alpha production in monocytes

RESUMO

Objetivo: Investigar os níveis de liberação de TNF-a?em cultura de monócitos em portadores humanos da forma hepatoesplênica de esquistossomose mansônica. Método: Foram incluídos aleatoriamente, no estudo, 39 voluntários de idades variando entre 15 e 31 anos, 19 homens e 20 mulheres, divididos em três grupos. Grupo 1 (GC) 12 indivíduos sadios, sem esquistossomose. Grupo 2 (AI) 18 indivíduos portadores de esquistossomose mansônica na forma hepatoesplênica, que tinham se submetido a esplenectomia, ligadurada veia gástrica esquerda e auto-implante de tecido esplênico no omento maior, quando tinham idades entre 7 e 16 anos. Esses pacientes receberam oxaminiquine na dose de 20mg/kg 30 dias antes do procedimento cirúrgico. O seguimento médio atual é de cerca de 8 anos. Grupo 3 - pacientes esplenectomizados sem autoimplanteesplênico (ESAI) constituído de nove adultos jovens que tinham se submetido à esplenectomia sem auto-implante esplênico e desconexão ázigo-porta. Os pacientes esquistossomóticos dos grupos 2 e 3 tiveram confirmação dessa doença pela presença de fibrose de Symmers nas biópsias hepáticas realizadas durante o ato cirúrgico. Foram colhidos 6 ml de sangue periférico de cada um dos voluntários incluídos no presente estudo, cujos monócitos foram separados por centrifugação e cultivados no meio de cultura CultilabÒ). Amostras de 100μl do sobrenadante da cultura de monócitos (106 células/ml), de cada indivíduo dos três grupos, eram colhidos para determinação das concentrações de TNF-a. Essa concentração era mensurada pelo estudo colorimétrico de ELISA para citocinas (QuanticininasTM – Sistema R&D), após 4 horas de estimulação com PMA e incubação, em uma atmosfera úmida com 5% de CO2 a 37oC. Resultados: As concentrações de TNF-a? não diferiram significantemente nos três grupos estudados [(GC 135,0 ± 51,6 pg/ml; AI 97,0 ± 25,4 pg/ml e ESAI 107,0 ±. 52,1 pg/ml) - ANOVA, F = 0,210; p = 0,813]...

ABSTRACT

Background: To investigate TNF-a levels released by monocyte culture in bearers of human hepatosplenic schistosomiasis mansoni. Methods: In this study we randomly included 39 volunteers with ages from 15 to 31 years, 19 men and 20 women, divided into three groups. Control Group 1 (CG) 12 healthy peoplewithout schistosomiasis. Auto implanted spleen group 2 (AIS) 18 young adults with hepatosplenic schistosomiasis mansoni who underwent splenectomy, ligature of the left gastric vein and auto implantation of spleen tissue into the major omentum, when the age varied between 7 and 16 years. These patientsreceived oxaminiquine in a single dose of 20mg/kg 30 days before the surgical treatment. The mean followup was about 8 years. Group 3 – splenectomyzed patients without auto implantation of spleen tissue (SP).Nine young adults were included and underwent total splenectomy without auto implantation of spleen tissue and azigo portal disconnection. The patients with schistosomiasis from groups I and III had the confirmation of their disease by the presence of Symmers fibrosis in the wedge liver biopsies during thesurgical procedure. Six 6ml of blood from all volunteers we collected. The monocytes were separated by centrifugation and cultivated in CultilabÒ medium. Supernatant samples of 100μl from the monocyte culture (106cells/ml), of each person were taken for the measure of TNF-a concentrations. This measure was performed by colorimetric ELISA (QuantikineTM – R&D systems), after 4 hours of stimulation with PMA and incubation with 37oC humid atmosphere of 5% CO2. Results: The TNF-a concentrations did not differ significantly among the three groups [(GC 135.0 ± 51.6 pg/ml; AIS 97.0 ± 25.4 pg/ml and SP 107.0 ±. 52.1pg/ml) - ANOVA F = 0.210; p = 0.813]...