Mecanismos envolvidos na arritmogênese em cardiomiócitos e desenvolvimento de modelo in vitro de fibrose e hipertrofia cardíaca induzidos por Trypanosoma cruzi / Mechanisms involved in arrythmogenesis into cardiomyocytes and development of in vitro model of cardiac hypertrophy and fibrosis induced by Trypanosoma cruzi

RESUMO

A infecção pelo protozoário Trypanosoma cruzi causa a doença de Chagas que entre as suas manifestações, apresenta uma severa forma cardíaca que pode gerar arritmias e morte súbita. No primeiro bloco desta dissertação nós avaliamos o efeito da infecção por T. cruzi no acoplamento celular e no cálcio intracelular de monocamadas de cardiomiócitos. Nós verificamos que durante o processo de invasão da célula hospedeira, o T. cruzi gera aumento dos níveis basais de cálcio e arritmias dos sinais cíclicos deste íon. Como já descrito por nosso grupo, este aumento é transmitido às células adjacentes. Neste trabalho buscamos verificar a expressão de conexina43, principal formadora de junções comunicantes no tecido cardíaco responsável pela passagem de íons e a sincronização da contratilidade. Nós verificamos que há um aumento significativo na expressão desta proteína nos tempos de invasão por t. cruzi (1hpi). Após 72 horas de infecção dos cardiomiócitos por T. cruzi nós observamos alterações na distribuição de cavéolas e diminuição na expressão de Cx43 e caveolina-3. Estudos in vivo demonstraram que a expressão de Cx43 também foi reduzida durante infecção aguda dos camundongos por T. cruzi. Estes resultados indicaram alteração em mecanismos envolvidos na manutenção da homeostase do cálcio intracelular e comunicação celular, esclarecendo alguns aspectos relacionados à aritmogênese causada pela infecção de cardiomiócitos por T. cruzi. No segundo bloco, utilizamos um modelo de interação do T. cruzi com um microtecido cardíaco in vitro, desenvolvido por nós. Os microtecidos apresentam estruturas similares às do tecido cardíaco in vivo e quando infectados por T. cruzi, observamos hipertrofia e fibrose, com aumento de moléculas de matriz extracelular tais como fibronectina, laminina e colágeno IV. Este modelo mimetiza in vitro importantes aspectos observados durante a doença de Chagas mais fidedignamente do que os modelos em monocamadas. O modelo de esferóides ...anti-T. cruzi.