Avaliação de diferentes procedimentos para extração de DNA a partir de esfregaços corados pelo método de Ziehl-Neelsen / Evaluation of different methods of DNA extraction from baciloscopic tests of Ziehl-Neelsen stainig
Cad. saúde colet., (Rio J.)
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15(3): 401-414, jul.-set. 2007. ilus, tab
Article
in Portuguese
| LILACS
| ID: lil-527820
RESUMO
O Pará é o estado com maior taxa de incidência de tuberculose (TB) na região Norte, com 36,3 casos por 100 mil habitantes em 2004. A obtenção de DNA de qualidade a partir de material fixado em lâminas coradas pelo método de Ziehl-Neelsen (ZN) supriria a falta de amostras representativas para estudos de genotipagem, contribuindo para melhor entendimento da dinâmica de transmissão da TB. O presente estudo avaliou quatro diferentes procedimentos para obtenção de DNA de M. tuberculosis a partir de 196 esfregaços corados pelo método de ZN, que utilizaram xilol e N-acetil-L-cisteína (NALC) em conjunto, de forma isolada ou nenhuma destas substâncias, e ainda dois protocolos de amplificação distintos, um com o adjuvante de PCR glicerol e outro com betaína. O percentual de amplificação foi superior para as amostras que foram submetidas ao procedimento que utilizou somente o xilol e ao que não utilizou nenhuma substância, sendo 77 por cento e 67 por cento, respectivamente, para o protocolo com glicerol, e de 98 por cento e de 96 por cento para o protocolo com betaína. A partir dos resultados obtidos, não é recomendado o uso de xilol ou NALC nos procedimentos de remoção das amostras e sugere-se a inclusão do adjuvante betaína nas reações, assim como o uso do DNA extraído de lâminas coradas pelo método de ZN em análises baseadas em PCR.
Full text:
Available
Index:
LILACS (Americas)
Main subject:
Polymerase Chain Reaction
/
Nucleic Acid Amplification Techniques
/
Mycobacterium tuberculosis
Type of study:
Practice guideline
/
Incidence study
Limits:
Humans
Language:
Portuguese
Journal:
Cad. saúde colet., (Rio J.)
Journal subject:
Public Health
Year:
2007
Type:
Article
Affiliation country:
Brazil
Institution/Affiliation country:
Instituto Evandro Chagas/BR
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