Expressão de transcritos de genes homeobox no carcinoma epidermóidede boca: análise por microarray, validação por qRT-PCR e relação com critériosclínicos de agressividade / Homeobox genes transcripts expression in oral squamous cell carcinoma: microarray analysis, qRT-PCR validation and association with clinical criteria of aggressiveness

RESUMO

A busca de marcadores moleculares para o refinamento diagnóstico, classificação eestabelecimento do prognóstico dos tumores, e individualização terapêutica tem sidofoco de várias pesquisas. O presente estudo teve como objetivo investigar, emcarcinoma epidermóide de língua e/ou assoalho bucal, a presença de transcritos dosgenes homeobox que pudessem se revelar marcadores moleculares de prognósticoe/ou agressividade tumoral. Após análise por microarray utilizando-se amostras detumores e margens classificados como mais e menos agressivos, os geneshomeobox HOXC13, HOXD10, HOXD11, IRX4, PROX1 e ZHX1 foram selecionadose sua hiper-expressão foi parcialmente validada por qRT-PCR. Observou-seaumento da expressão de HOXD10, HOXD11 e IRX4 em tumores com relação àsmargens correspondentes, bem como nos tumores menos agressivos em relação àssuas respectivas margens. Por outro lado, os genes PROX1 e ZHX1 estavam maisexpressos nas margens que nos tumores correspondentes. Esses resultadossugerem que a expressão alterada de HOXD10, HOXD11 e IRX4 pode participar nodesenvolvimento do carcinoma epidermóide de língua e/ou assoalho bucal,enquanto os genes PROX1 e ZHX1 provavelmente exibem perda de função ouestão silenciados na neoplasia. Houve uma tendência de associação entre aexpressão elevada de HOXD11 e presença de infiltrações linfática e perineural, egrau moderado de diferenciação da neoplasia, bem como entre a expressão elevadade HOXD10 e infiltração linfática. O gene IXR4 foi relacionado com um menor tempode sobrevida global. Não foi possível estabelecer, dentre os genes homeoboxvalidados por qRT-PCR, um gene ou uma combinação deles que pudesse(m) serutilizado(s) como marcador(es) de agressividade tumoral.

ABSTRACT

The search for molecular markers to diagnosis improvement, treatmentindividualization and establishment of oral squamous cell carcinoma prognosis hasbeen the focus of several studies. The present study investigated the presence ofspecific transcript of homeobox genes in squamous cell carcinoma of the tongueand/or floor of the mouth that might reflect relevant molecular markers of prognosisand/or tumor aggressiveness. After microarray analysis of tumor samples classifiedas more or less aggressive, and non tumoral margins, HOXC13, HOXD10, HOXD11,IRX4, PROX1 and ZHX1 selected and partially validated by qRT-PCR. Increasedexpression of HOXD10, HOXD11, IRX4 in tumors in comparison to margins as wellas in less aggressive tumors related to their margins was observed. On the otherhand, a decreased expression of PROX1 and ZHX1 was observed in marginscompared to their respective tumors. These results suggest that the alteredexpression of HOXD10, HOXD11 and IRX4 may participate in the development ofsquamous cell carcinoma of the tongue and/or floor of the mouth, while PROX1 andZHX1 probably present loss of function or are silenced in tumors. A tendency ofassociation between increased expression of HOXD11 and lymphatic and perineuralinfiltration, as well as moderately differentiated tumors, and increased expression ofHOXD10 and lymphatic infiltration was observed. Still, increased expression of IRX4may apparently influence global survival rate. However, the results of the presentstudy must be confirmed in a greater number of samples, and complemented with theevaluation of HOXD10, HOXD11, IRX4 protein levels. It was not possible toestablish, among homeobox genes validated through qRT-PCR, a gene or acombination of genes capable of predicting tumor aggressiveness.