Molecular biology applied to the laboratory diagnosis of bacterial endophthalmitis / Biologia molecular aplicada ao diagnóstico laboratorial de endoftalmite bacteriana

ABSTRACT

Bacterial endophthalmitis is a serious but uncommon intraocular infection which frequently results in vision loss. Early diagnosis and appropriate therapy are associated with better visual outcome. Conventional microbiological methods are currently used for microbiological characterization of eyes with suspected endophthalmitis. However, the sensitivity of bacterial detection from aqueous and vitreous humor using microbiology techniques is poor, and time-consuming to confirm the results. The application of molecular methods enhances significantly laboratory confirmation of bacterial endophthalmitis, demanding a shorter time to draw a definitive result and thereby promoting the early initiation of a more specific therapy to limit the empirical or unnecessary use of broad-spectrum antibiotics. PCR-based techniques, including post-PCR methods such RFLP, DNA probe hybridization and DNA sequencing have been successfully used for the diagnostic elucidation of clinically suspected bacterial endophthalmitis cases, showing promising application in the routine practice of ocular microbiology laboratories.

RESUMO

Endoftalmite bacteriana é uma infecção intraocular grave, mas de baixa frequência, podendo resultar em grande prejuízo visual. O diagnóstico precoce e a rápida instituição de terapia adequada estão associadas a um melhor prognóstico da doença. Os métodos microbiológicos convencionais são utilizados rotineiramente para caracterização microbiológica de olhos com suspeita de endoftalmite. No entanto, a sensibilidade de detecção bacteriana em amostras de humor aquoso e vítreo utilizando técnicas microbiológicas é baixa, além de demandar um maior tempo para a confirmação dos resultados. A utilização de métodos moleculares aumenta significativamente os casos de endoftalmite bacteriana confirmados laboratorialmente, com tempo menor para a liberação de um resultado definitivo, auxiliando assim a instituição precoce de uma terapia mais específica, limitando o uso empírico ou desnecessário de antibióticos de amplo espectro. A técnica de PCR e outras metodologias para análises pós-PCR como, RFLP, hibridização com sondas e sequenciamento do DNA, tem sido utilizadas com sucesso para elucidação diagnóstica em casos com suspeita clínica de endoftalmite bacteriana, demonstrando promissora aplicação para a rotina dos laboratórios de microbiologia ocular.