Identificación rápida de mutaciones puntuales en el gen katG (Catalasa-Peroxidasa) en cepas de Mycobacterium tuberculosis resistentes a isoniacida / Rapid identification of punctual mutations in the gene katG (Catalasa-Peroxidasa) in Mycobacterium's vine-stocks resistant tuberculoses to isoniacida

RESUMEN

Antecedentes Emplear los métodos tradicionales para la determinación de la susceptibilidad del Mycobacterium tuberculosis a diferentes antibióticos demora en el mejor de los casos 8 semanas. Si usßramos técnicas de biología molecular la identificación de cepas de Mycobacterium tuberculosis resistentes, mediante la detección rßpida de los polimorfismos asociados en estos genes, sería en unas pocas horas. Métodos: En94 cultivos positivos de M. tuberculosis resistentes a isoniacida se hizo la extracción de ADN según lo descrito por Van Soolingen. Con el ADN se uso la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) para la amplificación del gen katG. Para detectar la mutación Arg463Leu el fragmento amplificado fue digerido con Nci1 . La mutación del codón 315 fue detectada por digestión del producto de PCR con MspA1l. Resultados: Se encontró que sólo 9 (9.5 por ciento) de las 94 cepas resistentes tenían una mutación en el codón 463. En cambio con la endonucleasa de restricción MspA1l hemos encontrado que las 94 (100 por ciento) cepas tenían una mutación en el codón 315, siendo lamßs prevalente AGC@AAC(Ser315Thr).Conclusiones: El 100 por ciento de las 94 cepas de M. tuberculosis resistentes a isoniacida tuvieron una mutación en el codón 315 del gen katG.