Apoptosis por el virus de la fiebre amarilla investigada en celulas de mamifero crecidas directamente sobre laminas de vidrio / Apoptosis by Fever Virus Yellow investigated in cells mammal grown directly on glass slides

RESUMEN

Introducción: La muerte celular programada o apoptosis es un evento frecuente en células infectadas por virus. Existen varios procedimientos para investigar apoptosis en experimentos in vitro, para los cuales se requiere subcultivar células que crecen en frascos de 25 o 75 cm2, lo que resulta en prolongación del tiempo para obtener el resultado. Objetivo: En este estudio se investigó apoptosis en células Vero infectadas con el virus de la fiebre amarilla y crecidas directamente sobre láminas de vidrio usadas en pruebas de inmunofluorescencia. Resultados: Se detectó condensación de cromatina usando el colorante Hoescht 33342 en 93,2% de células infectadas versus 2,6% de no infectadas, en las 72 horas siguientes a la infección (P< 0.01). En las células infectadas se evidenció pérdida de la permeabilidad selectiva de la membrana por coloración con yoduro de propidio. Conclusiones: Estos resultados indican que usando un sistema rápido de cultivo de células puede evaluarse apoptosis durante la replicación in vitro del virus de la fiebre amarilla.

ABSTRACT

Introduction: Programmed cell death referred to as apoptosis is a frequent event in animal cells infected by viruses.There are many procedures to investigate apoptosis in vitro, experiments requiring subculture cells growing in flask of 25 – 75 cm2 wich to result in prolonged time to get results. Objective: In this study was investigated apoptosis in Vero cells infected with yellow fever virus directly growing on glass slices used in immunofluorescent tests. Results: After 72 hours of virus infection, 93,2% of infected cells (in contrast with 2,6% of not infected cells) showed condensation of chromatin, using stain Hoescht 33342. In the same cells, loss of selective permeability was evidenced by stained with propidium iodide. Conclusion: This results show that, when we use a rapid culture cell system, it is possible to detect apoptosis during yellow fever virus replication in vitro.