Efecto fototoxico de la terapia fotodinamica en promastigotes de leishmania amazonensis / Phototoxic effect of photodynamic therapy in promastigotes of Leishmania amazonensis

RESUMEN

Introducción: La terapia fotodinámica utiliza un compuesto fotosensibilizador que en presencia de luz y oxígeno produciendo especies reactivas de oxígeno induciendo la muerte de la célula blanco por apoptosis o necrosis. Estudios in vitro han mostrado que la ftalocianina de aluminio es fototóxica para Leishmania spp. Objetivo:El objetivo de este trabajo fue determinar el efecto del tratamiento con ftalocianina de aluminio clorada en los cambios morfológicos y de la actividad mitocondrial en promastigotes de Leishmania amazonensis. Materiales y métodos: Promastigotes de L amazonensis fueron incubados con ftalocianina de aluminio clorada y posteriormente irradiados con una fluencia de 17 Julios/cm2. De 0, 12 y 24 horas post irradiación los parásitos fueron contados microscópicamente para determinar la inhibición del crecimiento, fueron coloreados con Giemsa para determinar el efecto en los cambios morfológicos y fueron tratados con la sonda fluorescente JC-1 para determinar los cambios en la actividad mitocondrial. Resultados: El tratamiento fotodinámico inhibió el número de promastigotes hasta en un 96,37 %. Se observó reducción del tamaño, fragmentación nuclear y pérdida de núcleo y/o kinetoplasto y pérdida de la actividad mitocondrial. Conclusiones: La terapia fotodinámica es efectiva para la eliminación de promastigotes de L.amazonensis posiblemente por un mecanismo similar a la apoptosis.

ABSTRACT

Introduction: Photodynamic therapy uses a photosensitizer compound that in presence of light and molecular oxygen is activated producing reactive oxygen species and target cell death by apoptosis or necrosis. In vitro studies have demonstrated the phototoxic effect of aluminium phthalocyanine on Leishmania spp. Objective: The purpose of this study was to determine the effect of chloroaluminum phthalocyanine in the morphological and mitochondrial activity changes of Leishmania amazonensis promastigotes. Materials and methods: Parasites incubated with chloroaluminum phthalocyanine were irradiated with a fluency of 2.5 Julios/cm2. After 0, 12 and 24 hours post irradiation, they were counted microscopically to determine the percentage of inhibition; stained with Giemsa to determine the morphological changes; and treated with the fluorescent probe JC-1 to determine changes in activity mitochondrial. Results: Phothodynamic treatment inhibited the number of promastigotes reaching values of 96.37 %. There was observed downsizing, nuclear fragmentation and loss of nuclear core and / or kinetoplast and loss of mitochondrial activity immediately after irradiation. Conclusions: Photodynamic therapy is effective in eliminating promastigotes of L. amazonensis probably by an apoptosis like mechanism.