Optimization of visibility and quantification of aberrant crypt foci in colonic mucosa in Wistar rats / Otimização da visibilidade e quantificação de focos de criptas aberrantes em mucosa cólica de ratos Wistar

ABSTRACT

Purpose: Test immersion of microscopy samples in water as an aid to visualizing and quantifying aberrant crypt foci (ACF) in rat colon mucosa. Methods: Carcinogenesis was induced with azoxymethane in Wistar rats kept on a conventional diet or a hypercaloric diet containing unsaturated fat. Fifteen weeks after induction, colon samples were retrieved and fixated in a 10 percent formaldehyde solution. The samples were divided into segments (distal, middle, proximal) and stained with 1 percent toluidine blue. The technique tested in the study consisted of immersing microscopy samples in distilled water in order to eliminate the problem of light reflection known from conventional microscopy. Results: When samples were immersed in water during microscopy, significantly more ACF could be visualized in all colon segments than with the conventional method proposed by Bird. Conclusion: Immersing microscopy samples in water aids the visualization and quantification of aberrant crypt foci in rat colon mucosa fixed in formaldehyde.

RESUMO

Objetivo: Otimizar a visibilização de focos de criptas aberrantes (FCA) em mucosa cólica de ratos Wistar. Métodos: Colo de rato Wistar, sob diferentes dietas e submetidos a iniciação de carcinogênese pelo azoximetano há 4 meses, foram previamente lavados, abertos e fixados em solução de formalina a 10 por cento por 24 horas. Após serem corados em azul de toluidina a 1 por cento, foram divididos em segmentos distal, médio e proximal e imersos em água destilada para quantificação de FCA. Resultados: No método de imersão foi visibilizado maior quantidade de focos de criptas aberrantes em todos os segmentos cólicos, com diferença significante, quando comparado com o método de Bird. Conclusão: O método de imersão otimiza a visibilização e quantificação de focos de criptas aberrantes em mucosa cólica (ratos Wistar) fixada em solução de formalina a 10 por cento.