Avaliação dos perfis de resposta de macrófagos peritoneais de balb/c infectados in vitro com Leishmania amazonensis ou Leishmania braziliensis / Evaluation of response profiles of peritoneal macrophages of Balb / c infected in vitro with Leishmania amazonensis and Leishmania braziliensis

RESUMO

Macrófagos são células do sistema imunológico que desempenham importante papel na defesa contra Leishmania. Neste trabalho, foram investigados alguns fatores e mecanismos que podem estar envolvidos na determinação dos perfis de resposta de Macrófagos peritoneais de BALB/c infectados in vitro com L. amazonensis ou L. braziliensis. Observou-se que IFN-y não foi capaz de reduzir a infecção causada por ambas as espécies de Leishmania. A sinergia entre IFN-y e TNF-a leva a uma diminuição do percentual de infecção dos macrófagos por La e Lb no tempo de 72h. Tanto o pré-tratamento com IFN-y quanto com IFN-y e TNF-a não alterou a viabilidade de L. amazonensis isoladas de Macrófagos em relação ao grupo que não sofreu pré-tratamento. No entanto, L. braziliensis se mostrou susceptível a ação dessas citocinas, já que o pré-tratamento dos Macrófagos com IFN-y foi capaz de diminuir o número de parasitos viáveis isolados. A sinergia entre IFN-y e TNF-a se mostrou bastante efetiva nesse grupo uma vez que o número de Lb isoladas a partir dos Macrófagos infectados mostrou-se bastante reduzido. Embora não tenha sido detectada produção de NO nos grupos de Macrófagos infectados com La e Lb, o bloqueio da produção dessa molécula, tanto in vitro quanto in vivo, é capaz de aumentar a infecção por Lb, mas não altera a infecção por La. A avaliação da produção de IL-12, revelou que Macrófagos infectados com Lb produzem maior quantidade dessa citocina e apresentam uma maior expressão de RNAm de TNF-a nas primeiras 6h após infecção que os infectados por La. Por outro lado, a infecção com La induz uma maior produção de TGF-J3, maior expressão de RNAm de IL-10 e menor expressão de RNAm de quimiocinas e receptores dessas moléculas em relação ao grupo infectado com Lb. A investigação da atividade de arginase de La e Lb demonstrou que promastigotas de La apresentam uma elevada atividade de arginase, apresentando-se aproximadamente 50 a 100 vezes maior que nos promastigotas de Lb. Esses dados correlacionam-se com a maior carga parasitária e maior sobrevivência desse parasito no interior dos Macrófagos, enquanto que a menor atividade dessa enzima em Lb pode estar relacionada com a baixa carga parasitária, alta susceptibilidade aos mecanismos microbicidas dos Macrófagos e uma conseqüente diminuição na sobrevivência dessa espécie de Leishmania. Esses dados demonstram que La e Lb induzem perfis diferentes de resposta à infecção, tanto in vitro quanto in vivo, e sugerem que fatores produzidos pelo parasito, a exemplo de arginase, podem estar envolvidos no desenvolvimento desses perfis diferenciados de resposta.