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Leishmania spp. parasite isolation through inoculation of patient biopsy macerates in interferon gamma knockout mice / Leishmania spp.: isolamento de parasitos pela inoculação de macerados de biopsias de pacientes em camundongos deficientes em interferon gama
Oliveira, Milton Adriano Pelli de; Pires, Alause da Silva; Bastos, Rosidete Pereira de; Lima, Glória Maria Collet de Araujo; Pinto, Sebastião Alves; Pereira, Ledice Inácia de Araujo; Pereira, Ana Joaquina Cohen Serique; Abrahamsohn, Ises de Almeida; Dorta, Miriam Leandro; Ribeiro-Dias, Fátima.
  • Oliveira, Milton Adriano Pelli de; Universidade Federal de Goiás. Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública. Goiânia. BR
  • Pires, Alause da Silva; Universidade Federal de Goiás. Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública. Goiânia. BR
  • Bastos, Rosidete Pereira de; Universidade Federal de Goiás. Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública. Goiânia. BR
  • Lima, Glória Maria Collet de Araujo; Universidade Federal de Goiás. Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública. Goiânia. BR
  • Pinto, Sebastião Alves; Instituto Goiano de Oncologia e Hematologia. Goiânia. BR
  • Pereira, Ledice Inácia de Araujo; Universidade Federal de Goiás. Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública. Goiânia. BR
  • Pereira, Ana Joaquina Cohen Serique; Hospital de Doenças Tropicais Anuar Auad. Goiânia. BR
  • Abrahamsohn, Ises de Almeida; Universidade de São Paulo. Instituto de Ciências Biomédicas. São Paulo. BR
  • Dorta, Miriam Leandro; Universidade Federal de Goiás. Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública. Goiânia. BR
  • Ribeiro-Dias, Fátima; Universidade Federal de Goiás. Instituto de Patologia Tropical e Saúde Pública. Goiânia. BR
Rev. Inst. Med. Trop. Säo Paulo ; 52(2): 83-88, Mar.-Apr. 2010. ilus, tab
Article in English | LILACS | ID: lil-545754
ABSTRACT
Isolation of Leishmania parasite and species identification are important for confirmation and to help define the epidemiology of the leishmaniasis. Mice are often used to isolate pathogens, but the most common mouse strains are resistant to infection with parasites from the Leishmania (Viannia) subgenus. In this study we tested the inoculation of interferon gamma knockout (IFNγ KO) mice with biopsy macerates from Leishmania-infected patients to increase the possibility of isolating parasites. Biopsies from twenty five patients with clinical signs of leishmaniasis were taken and tested for the presence of parasites. Immunohistochemical assay (IHC) and conventional histopathology detected the parasite in 88 percent and 83 percent of the patients, respectively. Leishmania sp. were isolated in biopsy macerates from 52 percent of the patients by culture in Grace's insect medium, but 13 percent of isolates were lost due to contamination. Inoculation of macerates in IFNγ KO mice provides isolation of parasites in 31.8 percent of the biopsies. Most isolates belong to L. (Viannia) subgenus, as confirmed by PCR, except one that belongs to L. (Leishmania) subgenus. Our preliminary results support the use of IFNγ KO mice to improve the possibility to isolate New World Leishmania species.
RESUMO
O isolamento e a identificação da espécie de parasito do gênero Leishmania são importantes para a confirmação e auxiliam na epidemiologia da leishmaniose. Os camundongos são freqüentemente utilizados para isolar patógenos, porém, as linhagens mais comuns de camundongos são resistentes à infecção por parasitos do subgênero Leishmania (Viannia). Neste estudo, avaliamos a inoculação de macerados de biópsias de pacientes infectados em camundongos deficientes do gene do interferon gama (IFNγ KO) como um método para aumentar a possibilidade de isolar Leishmania spp. Biópsias de 25 pacientes infectados com Leishmania sp. foram avaliadas para a presença de parasitos pelos métodos de imunohistoquímica (IHC) e histopatologia convencional. Os parasitos foram observados, respectivamente, em 88 por cento e 83 por cento das biópsias. Leishmania sp. foi isolada de macerados de biópsia de 52 por cento dos pacientes infectados, quando cultivados em meio Grace, porém, 13 por cento destes isolados foram perdidos devido a contaminações. Inoculação dos macerados em camundongos IFNγ KO proporcionou o isolamento de parasitos oriundos de 31,8 por cento dos pacientes. A maioria dos isolados pertence ao subgênero L. (Viannia), exceto um que pertence ao subgênero L. (Leishmania), como confirmado pela reação da polimerase em cadeia. Nossos resultados preliminares sugerem que o uso de camundongos IFNγ KO pode ser útil para aumentar a possibilidade de isolamento de leishmânias encontradas nas Américas.
Subject(s)

Full text: Available Index: LILACS (Americas) Main subject: Skin / Mice, Knockout / Leishmania Type of study: Prognostic study Limits: Animals / Humans Language: English Journal: Rev. Inst. Med. Trop. Säo Paulo Journal subject: Tropical Medicine Year: 2010 Type: Article / Project document Affiliation country: Brazil Institution/Affiliation country: Hospital de Doenças Tropicais Anuar Auad/BR / Instituto Goiano de Oncologia e Hematologia/BR / Universidade Federal de Goiás/BR / Universidade de São Paulo/BR

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