A simplified DNA extraction method for PCR analysis of Camarotella spp

ABSTRACT

This work aimed to optimize an efficient and simple protocol for DNA extraction of Camarotella species, an obligate plant pathogen that cause verrucosis or "lixa" on coconut tree and other palms, facilitating the molecular studies of these biotrophic microorganisms. The method proposed enabled a fast, reproducible and reliable DNA extraction from Camarotella species.

RESUMO

A extração e amplificação de DNA são etapas fundamentais para a aplicação de métodos moleculares e para tal, a origem do material é relevante. As espécies do gênero Camarotella que causam as lixas do coqueiro e outras palmeiras são biotróficas e o crescimento em meio artificial é controverso, embora Oliveira et. al, (2004) tenham registrado seu cultivo in vitro, utilizando meio líquido completo. No entanto, não ficou provado que o micélio formado correspondia ao micélio de Camarotella. Em conseqüência das dificuldades com o cultivo dos agentes etiológicos das lixas, foi otimizado um protocolo para extração de DNA genômico a partir do himênio ascógeno in natura e um protocolo de PCR para sua amplificação. Nossos resultados são importantes para o estudo da família Phyllachoraceae, pois possibilitará a análise molecular que, nessa família, é limitada pela dificuldade de obtenção de DNA.