Avaliação da expressão da caspase-3 no adenocarcinoma colorretal através de um sistema computadorizado de análise de imagem / Evaluation of caspase-3 markers expression in colorectal adenocarcinoma by a computadorized image analysis system

RESUMO

RACIONAL O câncer colorretal é uma das causas mais comum de mortes por neoplasias malignas no mundo ocidental, sendo que o adenocarcinoma colorretal representa mais de 90 por cento dos tumores malignos que acometem o intestino grosso. A cisteíno-protease caspase-3, uma das mais participantes enzimas do processo apoptótico, pode ser utilizado como marcador tumoral. OBJETIVO: Identificar e quantificar a expressão da caspase-3 em amostras de adenocarcinomas colorretais através de um sistema computadorizado de análise de imagem, bem como correlacionar a expressão deste marcador. MÉTODOS: Foi estudada por imunoistoquímica a proteína caspase-3 em 55 amostras de adenocarcinoma colorretal parafinizadas. Para analisar os tecidos imunomarcados, o sistema SAMBA 4000 foi utilizado. Avaliaram-se as lâminas com o programa IMMUNO 4.00 através da leitura de 8 a 10 campos, determinando-se dois parâmetros índice de marcagem (LI, Labeling Index) que descreve a porcentagem de área tecidual especificamente marcada pela prova imunoistoquímica, e a densidade óptica média (MOD, Mean Optical Density), a qual representa a intensidade de coloração do tecido medida por pixels positivos. Para a análise estatística, utilizou-se o teste t-Student e o coeficiente de Pearson para verificar a existência de correlação entre índice de marcagem e a densidade óptica média do mesmo marcador. RESULTADOS: Todas as amostras estudadas apresentaram positividade à caspase-3 (LI médio 85,24 por cento ± 8,71 por cento de células positivas). Houve correlação estatisticamente significante entre o índice de marcagem e a densidade óptica média deste marcador. CONCLUSÃO: A intensidade da expressão de caspase-3 e o número de células expressando este marcador correlacionam-se positiva e significantemente.

ABSTRACT

BACKGROUND: Colorectal cancer is one of the most common causes of death for malignant neoplasm in the Occidental World, corresponding colorectal adenocarcinoma to represent more than 90 percent of malignant tumors in large bowel. Caspase-3 cysteine protease, one of the most important enzymes related in the apoptosis process, may be used as a tumor marker. AIM: To identify and quantify Caspase-3 expression in colorectal adenocarcinoma samples and to correlate the marker expression using an image computerized analysis system. METHOD: Caspase-3 expressions were studied by immunohistochemistry in 55 colorectal adenocarcinoma sampled-tissues, prepared in paraffin blocks. SAMBA 4000 System was used for the immunostained tissues analysis. Microscopic evaluation was performed by the IMUNNO 4.00 software, which analyzed 8 to 10 fields in order to determine two parameters Labeling Index (LI), indicating the percentage of cells specifically stained by immunohistochemistry, and Mean Optical Density (MOD), representing enhance intensity, measured by positive pixels. For the statistical analysis, t-Student test and Pearson coefficient verified the possible correlation concerning LI and MOD. RESULTS: All samples presented positivity for Caspase-3 expression (LI 85,24 percent ± 8,71 percent positive cells). Caspase-3 expression revealed statistically significance correlation between LI and MOD (P = 0,013). CONCLUSIONS: The intensity of Caspase-3 expression and the number of positive cells expressing such a marker showed a positive and significant correlation.