Detección molecular de complejo mycobacterium tuberculosis frente a baciloscopia y cultivo en muestras de lavado borncoaveolar para tuberculosis pulmonar / Molecular detection of mycobacterium tuberculosis complex against baciloscopy and cultivation for the diagnostic of lung tuberculosis

RESUMEN

La utilidad de la baciloscopia, cultivo en medio Lowestein Jensen y la Reacción en Cadena de la Polimerasa (RCP) fue evaluada en 35 muestras obtenidas del lavado broncoalveolar (LBA) mediante fibroncoscopia, provenientes de pacientes de ambos sexos, sin distinción de grupo étnico y edades comprendidas entre los 26 y 78 años, con manifestaciones clínicas y/o, hallazgos radiológicos sugestivos de tuberculosis pulmonar en el periodo 2008-2009 en el servicio de neumología del Complejo Hospitalario San Pablo Sede Surco. A todas las muestras, se les practicó baciloscopia utilizando la técnica de colaboración de Ziehl-Neelsen. Se utilizó el medio de cultivo Lowestein Jensen como estándar. Los objetivos para el ensayo de RCP fueron los genes que codifican la proteína de 123pb y la secuencia de inserción IS6110. Del total de muestras examinadas por el método de Ziehl-Neelsen, 20 resultaron positivas y 15 resultaron negativas (57,14 y 42,85 por ciento respectivamente). De las 35 muestras sembradas 22 (62,85 por ciento) resultaron positivas y 13 (37,14 por ciento) fueron negativas al cultivo. De todas las muestras amplificadas, 25 (71,42 por ciento) mostraron la presencia de fragmentos de ADN correspondientes tanto a la secuencia de inserción IS6110, mientras que en 10 (28,57 por ciento) no se detecto la presencia de ADN micobacteriano por el método de RCP. La sensibilidad de la prueba RCP fue virtualmente de 100 por ciento y su especificidad fue del 75 por ciento. Se demostró que el RCP, basado en la amplificación simultánea del elemento de inserción IS6110 y del gen que codifica en la proteína 123pb puede identificar infecciones por micobacterias a partir de muestras obtenidas mediante lavado broncoalveolar por fibrobroncoscopia. Se concluye que esta técnica es más sensible que los procedimientos bacteriológicos de rutina (examen directo y cultivo) y la convierten en una herramienta muy poderosa para el diagnóstico de tuberculosis pulmonar y otras enfermedades micobac...

ABSTRACT

The utility of baciloscopy, cultivation and Polimerasa Chain Reaction of (PCR) was evaluated in 35 samples from fobrobroncoscophy, of patient of patient of both sexes, without distinction of etnial group and ages between 26 and 78 years, with clinical manifestations, and/or discoveries radiological data of lung tuberculosis. To all the samples they were practiced baciloscopy using the technique of Ziehl-Neelsen. The Lowenstein Jensen cultivation was used like standard. The objectives protein 123pb and the insertion sequence IS6110. Of the total of samples examined by the Ziehl-Neelsen method, 20 were positive and 15 were negative (57.28 and 42 per cent respectively). 22 samples (54.28 per cent) were positive and 13 (45.71 per cent) were negative to the cultivation. Of all amplified samples, 25 (71.42 per cent) showed the precense of fragments corresponding to DNA so much to the sequence of insert IS6110, while in 10 (28.57 per cent) presence of DNA mycobacterium was not detected for RCP method. The sensibility of the RCP test was virtually 100 per cent and its specificity was of 75 per cent. It was demonstrated that RCP, based on the simultaneous amplification of the insertion element IS6110 and the gene that codes the protein 123pb, can identify mycobacterium infections. We conclude also that is more sensitive that routine bacteriological procedures (direct exam and cultivation) and can be a very powerful tool for the diagnosis of lung tuberculosis and other mycobacterium diseases.