Efeito do estradiol e da progesterona no desenvolvimento e na qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro / Effect of estradiol and progesterone on development and quality of bovine embryos produced in vitro

RESUMO

Avaliaram-se o desenvolvimento e a qualidade de embriões bovinos, cocultivados com células epiteliais do oviduto bovino (CEOBs) expostas ou não ao estradiol e à progesterona. Os ovócitos foram maturados in vitro por 24h e, então, fertilizados utilizando-se sêmen congelado, em estufa de CO2 a 5 por cento e 38,5ºC. As CEOBs foram cultivadas em TCM-199 com ou sem estradiol (E2) (24 horas), nas mesmas condições da maturação e fertilização in vitro (MIV e FIV), e, em seguida, adicionadas aos diferentes grupos em CR2 com ou sem progesterona (P4) (G1=P4+E2); (G2=E2); (G3=P4) e (G4=controle). Após 18h da FIV, as células foram cultivadas nos diferentes sistemas. Nenhuma diferença (P>0,05) foi observada nas taxas de clivagem entre G1, G2 e G4 (53,5 por cento; 56,3 por cento; 51,7 por cento) e nos padrões de blastocistos (BLs) (29,3 por cento; 31,2 por cento, 28,7 por cento). Índices menores (P<0,05) foram obtidos no G3 para ambas as variáveis (34,5 por cento; 16,4 por cento). G1 e G2 apresentaram taxas de eclosão maiores (P<0,05) que os outros grupos (23,3 por cento; 23,2 por cento), sendo G4 (19,3 por cento) diferente de G3 (16,1 por cento). Em G1, G2 e G3, o número de células nos BLs aumentou 125,9; 128,4 e 123,6, respectivamente (P<0,05), em relação ao G4 (112,5). Conclui-se que o tratamento das CEOBs com o E2, nas primeiras 24 horas de cultivo, pode ser usado isoladamente ou em combinação com a progesterona, a fim de melhorar a qualidade de embriões bovinos produzidos in vitro.

ABSTRACT

The development and quality of bovine embryos co-cultivated with bovine oviduct epithelial cells (BOEC) supplemented or not with estradiol and progesterone were evaluated. Oocytes were matured and fertilized in vitro (MIV/FIV) (5 percentCO2/38.5ºC). The BOEC were cultivated in TCM-199 with or without estradiol (E2) (24h), in the same conditions of MIV/FIV. Presumptive zygotes were transferred to BOEC in suspension after in vitro maturation and fertilization of bovine oocytes with thawed percoll-selected sperm. The zygotes were cultivated in CR2 medium containing or not progesterone (P4) (G1=P4+E2), (G2=E2), (G3=P4), and (G4=control). No significant differences (P>0.05) were found in the cleavage rates among G1, G2, and G4 (53.5 percent, 56.3 percent, and 51.7 percent) as well as in relation to the blastocystis (BL) rates (29.3 percent, 31.2 percent, and 28.7 percent). However, significant differences (P<0.05) were observed in the G3 for both variables (34.5 percent and 16.4 percent). G1 and G2 showed hatching rates higher (P<0.05) than the other groups (23.3 percent; 23.2 percent), being G4 (19.3 percent) different from G3 (16.1 percent) (P<0.01). In the groups G1, G2, and G3, the total cell number of the BL increased (125.9, 128.4, and 123.6) (P<0.05) compared to G4 (112.5). These results demonstrate that the treatment of the BOEC with estradiol in first the 24 hours of culture can be used separately or in combination with the progesterone to improve the quality of bovine embryos produced in vitro.