Avaliação da reação em cadeia da polimerase na detecção de trypanosoma cruzi em soro e em sangue de pacientes com doença de chagas crônica / Evaluation of polymerase chain reaction detection of trypanosoma cruzi in serum and blood of patients with chronic chagas disease

RESUMO

O diagnóstico sorológico da doença de Chagas apresenta algumas desvantagens, tanto na fase aguda devido à falta de kits comerciais aprovados pela ANVISA, quanto na fase crônica, nos casos de diagnósticos inconclusivos ou discordantes, além de não ser o método ideal para diagnosticar a infecção por transmissão congênita. Uma alternativa para a confirmação é o uso da técnica da PCR que apresenta alta sensibilidade e especificidade. No presente trabalho, objetivou-se avaliar a eficácia da ferramenta da biologia molecular, indicada pelo Ministério da Saúde como diagnóstico confirmatório da doença de Chagas, a PCR, utilizando amostras de soro como um potencial meio de extração de DNA do parasito. Para isso, foram coletadas amostras de sangue e soro de 65 pacientes chagásicos (FC=39, FM=10, FD=5, FI=9 e DES=2), selecionados no Ambulatório de Doença de Chagas do Hospital Universitário Oswaldo Cruz. Todos os pacientes foram avaliados clinicamente para caracterização das formas clínicas e realizaram exames confirmatórios para infecção pelo T. cruzi. Além disso, também foram coletadas amostras de 35 indivíduos não chagásicos (área endêmica=9 e área não endêmica=26) que apresentaram sorologia negativa para infecção. Inicialmente, foram analisadas três formas de extração do material de sangue e soro. Após a escolha da melhor forma de extração, as amostras de sangue e soro dos pacientes chagásicos crônicos e não chagásicos foram aplicados na técnica de PCR com a finalidade de avaliar a sensibilidade e especificidade, como também a concordância dos resultados. Ocorreu predominância da forma cardíaca (60 por cento) entre os portadores da infecção pelo T. cruzi. Os resultados da técnica de PCR, utilizando amostras de soro, apresentaram uma sensibilidade estatisticamente superior (61,3 por cento) à amostra de sangue (41,5 por cento). Quando analisado o resultado utilizando as amostras simultaneamente (sangue e soro), obteve-se um valor da sensibilidade aumentado...