Leucocitos e inflamação em pacientes com anemia falciforme / Leukocytes and inflammation in sickle cell disease patients

RESUMO

Os pacientes com anemia falciforme sofrem repetidos episódios de vasooclusâo caracterizados por lesão de isquemia-reperfusão e inflamação. Por esse motivo, a anemia falciforme é considerada um modelo de doença da microvasculatura, no qual há interação entre o endotélio, plaquetas, hemácias e leucócitos. Os objetivos deste trabalho foram investigar o papel de leucócitos mononucleares no processo inflamatório da anemia falciforme e a liberação de citocinas relacionadas à ativação do sistema NADPH oxidase em monócitos de pacientes com anemia falciforme estáveis. TNF-a, IFN-y e IL-10 foram detectados por meio de técnica de ensaio imunoenzimático (ELISA), utilizando kits comerciais. Após 24 horas de cultura com PHA; leucócitos mononucleares (PBMCs) de controles sadios liberaram quantidades significativamente maiores de TNFct, em relação aos de pacientes falciformes (p=0,02). Após 8 horas de cultura com LPS, também observamos maior liberação de TNF-a por PBMCs de controles sadios em relação aos pacientes falciformes (p=0,04). A liberação de TNF-a por monócitos de pacientes com doença falciforme e de controles sadios foi similar quando as células foram cultivadas em condições basais por 24 horas (p=0,25) ou após 24h (p=0,48) ou 48 horas de cultura com LPS (p=0,47). Após 48 horas de cultura com PFIA, a liberação de TNF-y por linfócitos de pacientes com doença falciforme foi...

ABSTRACT

Sickle cell disease patients suffer repeated episodes of vaso-occlusion. These episodes are characterized by ischemia-reperfusion injury and inflammation. Thus, sickle cell disease is considered a model of microvessel disease and a complex interaction among endothelial cells, platelets, erythrocytes and leukocytes. The aim of this study was to investigate the role of mononuclear leukocytes in the inflammatory process of sickle cell disease and the release of cytokines related to the NADPH oxidase components activation in mononuclear leukocytes from patients with sickle cell disease (SCD). TNF-a, IFN-y and IL-10 were detected in culture supernatants by standard commercial ELISA immunoassay kits. There was significant higher release of TNF-a by PBMC from healthy controls compared to SCD patients after 24h PHA stimulus (p-0.02) or 8h LPS stimulus (p=0.04). There was no significant difference in the release of TNF-a by monocytes from SCD patients compared to healthy controls. INF-y release by lymphocytes from SCD patients was significantly higher compared to healthy controls...