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Análise de restrição enzimática do gene hsp65 de isolados clínicos de pacientes com suspeita de tuberculose pulmonar em Teresina, Piauí / Restriction enzyme analysis of the hsp65 gene in clinical isolates from patients suspected of having pulmonary tuberculosis in Teresina, Brazil
Bona, Maria das Graças Motta e; Leal, Maria José Soares; Martins, Liline Maria Soares; Silva, Raimundo Nonato da; Castro, José Adail Fonseca de; Monte, Semiramis Jamil Hadad do.
  • Bona, Maria das Graças Motta e; Universidade Federal do Piauí. Teresina. BR
  • Leal, Maria José Soares; Universidade Federal do Piauí. Teresina. BR
  • Martins, Liline Maria Soares; Universidade Estadual do Piauí. Teresina. BR
  • Silva, Raimundo Nonato da; Universidade Federal do Piauí. Laboratório de Imunogenética e Biologia Molecular. Teresina. BR
  • Castro, José Adail Fonseca de; Universidade Estadual do Piauí. Teresina. BR
  • Monte, Semiramis Jamil Hadad do; Universidade Federal do Piauí. Teresina. BR
J. bras. pneumol ; 37(5): 628-635, set.-out. 2011. tab
Article in Portuguese | LILACS | ID: lil-604390
RESUMO

OBJETIVO:

Identificar as espécies de micobactérias encontradas no escarro de pacientes com suspeita de tuberculose pulmonar e analisar o impacto dessas identificações na abordagem terapêutica.

MÉTODOS:

Foram avaliados 106 pacientes com suspeita de tuberculose pulmonar encaminhados para o serviço de pneumologia de um hospital público em Teresina, Piauí. Espécimes de escarro matinal foram avaliados quanto à presença de micobactérias por baciloscopia e cultura. Foram utilizadas PCR e análise de restrição enzimática do gene hsp65 (PRA-hsp65) para a identificação das cepas de micobactérias isoladas em cultura.

RESULTADOS:

Foram analisadas 206 amostras de escarro. A idade dos pacientes variou de 15 a 87 anos, sendo 67 por cento do gênero masculino. Tosse ocorreu em 100 por cento dos casos. O padrão radiográfico predominante foi de lesão moderada, observada em 70 por cento. A positividade no esfregaço foi de 76 por cento, e isolamento em cultura ocorreu em 91 por cento das culturas executadas. Testes tradicionais identificaram micobactérias não tuberculosas (MNT) em 9 por cento dos isolados. O método PRA-hsp65 confirmou esses dados, mostrando sete padrões de bandas capazes de identificar as espécies de MNT isoladas Mycobacterium kansasii; M. abscessus 1; M. abscessus 2; M. smegmatis; M. flavescens 1; M. gordonae 5 e M. gordonae 7. Todos os pacientes com MNT tinham mais de 60 anos, e observaram-se bronquiectasias em 88 por cento das radiografias. Houve dois casos de reinfecção, identificados inicialmente como infecção por M. abscessus e M. kansasii.

CONCLUSÕES:

As MNT causam infecção pulmonar em pacientes imunocompetentes, e a identificação das MNT é importante para estabelecer o diagnóstico correto e a decisão terapêutica mais adequada. O método PRA-hsp65 é útil para identificar espécies de MNT e pode ser implantado em laboratórios de biologia molecular não especializados em micobactérias.
ABSTRACT

OBJECTIVE:

To identify mycobacterial species in the sputum of patients suspected of having pulmonary tuberculosis and to determine the impact that the acquisition of this knowledge has on the therapeutic approach.

METHODS:

We evaluated 106 patients suspected of having pulmonary tuberculosis and referred to the pulmonology department of a public hospital in the city of Teresina, Brazil. Morning sputum specimens were evaluated for the presence of mycobacteria by sputum smear microscopy and culture. We used PCR and restriction enzyme analysis of the hsp65 gene (PRA-hsp65) to identify the strains of mycobacteria isolated in culture.

RESULTS:

A total of 206 sputum samples were analyzed. Patient ages ranged from 15 to 87 years, and 67 percent were male. There was cough in 100 percent of the cases. The predominant radiographic pattern was moderate disease, observed in 70 percent. Smear positivity was 76 percent, and isolation in culture occurred in 91 percent of the cultures. Traditional tests identified nontuberculous mycobacteria (NTM) in 9 percent of the isolates. The PRA-hsp65 method confirmed these data, showing seven band patterns that were able to identify the isolated species of NTM Mycobacterium kansasii; M. abscessus 1; M. abscessus 2; M. smegmatis; M. flavescens 1; M. gordonae 5; and M. gordonae 7. All of the patients with NTM were over 60 years of age, and bronchiectasis was seen in 88 percent of the X-rays. There were two cases of reinfection, initially attributed to M. abscessus and M. kansasii.

CONCLUSIONS:

In immunocompetent patients, NTM can infect the lungs. It is important to identify the specific NTM in order to establish the correct diagnosis and choose the most appropriate therapeutic regimen. The PRA-hsp65 method is useful in identifying NTM species and can be implemented in molecular biology laboratories that do not specialize in the identification of mycobacteria.
Subject(s)


Full text: Available Index: LILACS (Americas) Main subject: Sputum / Bacterial Proteins / Tuberculosis, Pulmonary / Restriction Mapping / Nontuberculous Mycobacteria Type of study: Diagnostic study / Prognostic study Limits: Adolescent / Adult / Aged / Aged80 / Female / Humans / Male Country/Region as subject: South America / Brazil Language: Portuguese Journal: J. bras. pneumol Journal subject: Pulmonary Disease (Specialty) Year: 2011 Type: Article Affiliation country: Brazil Institution/Affiliation country: Universidade Estadual do Piauí/BR / Universidade Federal do Piauí/BR

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