Búsqueda del plásmido de virulencia de Salmonella en aislamientos clínicos colombianos / Search of the Salmonella virulence plasmid in Colombian clinical isolates

RESUMEN

Introducción: Salmonella es un bacilo Gram negativo, patógeno intracelular que invade células intestinales no fagocíticas y macrófagos en un proceso complejo que requiere múltiplesgenes. El plásmido de virulencia de Salmonella “spv” contiene el gen spvR cuya función es aumentarsu virulencia produciendo invasión sistémica en ratones.Métodos: Se buscó el gen spvR de Salmonella spp en aislamientos clínicos humanos provenientes de pacientes con sintomatología sistémica (fiebre tifoidea) y no sistémica (diarrea), con el fin de comparar la presencia del gen con la clínica del paciente. El gen spvR se buscó en 55 aislamientosde S. Typhi de pacientes con fiebre tifoidea, 20 de S. Enteritidis y 20 de S. Typhimurium, aislados de pacientes con diarrea. Se realizó PCR a partir de ADN genómico y plasmídico. Los productos sesecuenciaron y las secuencias obtenidas de material genómico y plasmídico se compararon utilizando análisis bioinformáticos Resultados: El 100 % de los aislamientos de S. Typhifueron negativos para spvR, mientras que 75 % de losaislamientos de S. Enteritidis y 40 % de S. Typhimurium,presentaron amplificación del gen spvR, tanto en material genómico como plasmídico. Se evidenció tambiénla presencia de secuencias plasmídicas homólogas al gen spvR en regiones cromosomales de los serotiposestudiados.Conclusiones: Los resultados muestran que la ausenciadel plásmido de virulencia de Salmonella no está relacionadacon la infección sistémica, pues no fue encontrado en S. Typhi productora de fiebre tifoidea. Se confirmótambién que existe material cromosomal homólogo al genspvR del plásmido de virulencia en el cromosoma de los serotipos S. Enteritidis y S. Typhimurium, pero no seencontró material similar en el cromosoma de S. Typhi.

ABSTRACT

Introduction: Salmonella is a Gram negative bacillus,intracellular pathogen that invades nonphagocytic intestinal cells and macrophages in a complex process that requires multiple genes.The salmonella virulence plasmid “spv” contains the spvR gene whose function is to increase its virulence producing systemic invasion in mice. Methods: We search for spvR gene in human clinicalisolates of Salmonella spp from patients with systemic infection (typhoid fever) and with nonsystemic infection (diarrheal), in order to comparethe presence of the gene to clinical outcome. spvR was searched in 55 clinical isolates of S. Typhi from typhoid fever patients, 20 of S. Enteritidisand 20 of S. Typhimurium isolates frompatients with diarrheal. PCR from chromosomal and plasmid DNA was performed. The PCR productswere sequenced and the sequences obtained from genomic and plasmid materials were compared using bioinformatics analysis.Results: 55 (100 %) isolates of S. Typhi were negativefor spvR. 15 (75 %) isolates of S. Enteritidis and 8 (40 %) of S. Typhimurium were positive forspvR both from genomic and plasmid material. These results show that clinical isolates of S.Typhi considered more virulent not showed spvR, and that diarrhea-producing serotypes S. Enteritidisand S. Typhimurium in 75 and 40 % respectively were positive for the gene, questioning the role of virulence of the gene in strains producing human infections. It also showed the presenceof plasmid gene sequences homologous to chromosomal regions in the studied serotypes.Conclusion: Results show that the absence of the plasmid of Salmonella’s virulence is not relatedwith the systemic outcome in the clinical isolates of Salmonella Typhi that were studied. There was also confirmed that exists chromosomal material homologous to the gene spvR virulenceplasmid in the chromosome of serotypes S. Enteritidis and S. Typhimurium but similar material wasn’t found in S. Typhi chromosome.