Incorporación química de la sonda fluorescente FlAsH en la proteína Hha: aplicación al estudio del complejo Hha/H-NS / Chemical incorporation of fluorescent probe flAsH on the Hha protein: application to the study of complex Hha/H-NS
NOVA publ. cient
;
7(11): 12-20, ene.-jun. 2009. ilus, graf
Article
in Spanish
| LILACS
| ID: lil-613055
RESUMEN
El objetivo de esta investigación fue realizar estudios de incorporación de la sonda FlAsH como posible herramienta para el estudio in vitro e in vivo de la proteína Hha y de su interacción con H-NS. Se construyó una proteína con la secuencia específica CCPGCC capaz de unir la sonda fluorescente FlAsH; posteriormente se desarrollaron procesos de transformación, expresión y purificación, con los cuales se evidenció que a pesar de introducir una secuencia adicional no nativa a la proteína, se pudo obtener proteína en buena cantidad, estabilidad, rendimiento y con un alto nivel de pureza. La optimización del protocolo de incorporación del FlAsH se hizo teniendo en cuenta el rendimiento y el tiempo de reacción. El complejo FlAsH/HhaCCPGCC se caracterizó mediante fluorescencia y se comprobó mediante MALDI TOF. La incorporación HhaCCPGCC1/ FlAsH no se obtuvo en un alto porcentaje como se esperaba, por esta razón no se pudieron hacer los estudios de interacción entre el complejo de proteínas Hha y H-NS.
Full text:
Available
Index:
LILACS (Americas)
Main subject:
Molecular Probes
/
Proteins
/
Fluorescence
/
Nucleotides
Language:
Spanish
Journal:
NOVA publ. cient
Journal subject:
Bacteriology
/
Biology
Year:
2009
Type:
Article
Affiliation country:
Colombia
/
Spain
Institution/Affiliation country:
Universidad CES/CO
/
Universidad de Barcelona/ES
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