Avaliação do método da imunofenotipagem por citometria de fluxo no diagnóstico das doenças displásicas (SMD, LMA-relacionada à mielodisplasia, LMMC e LMMJ) em adultos e crianças / Evaluation of the method of immunophenotyping by flow cytometry in the diagnosis of dysplastic disease (MDS, AML-related to myelodysplasia,CMML and JMML) in adults and children

RESUMO

As síndromes mielodisplásicas (SMD) se caracterizam por terem uma hematopoese displásica, citopenias e pelo risco de progressão para leucemia mielóide aguda. O diagnóstico baseia-se na clínica e nos achados citomorfológicos da medula óssea (MO) e citogenéticos. Na fase inicial ou quando a MO é hipocelular o diagnóstico é difícil e a citogenética frequentemente é normal. A imunofenotipagem (IMF) tem sido cada vez mais utilizada nos casos de SMD em adultos e pouco explorada na SMD pediátrica. Os nossos objetivos foram estudar os casos de SMD e doenças correlatas (LMA relacioanda à SMD LMA-rMD; leucemia mielomonocítica crônica LMMC e leucemia mielomonocítica juvenil LMMJ) em adultos e crianças, associando os dados clínicos e laboratoriais aos obtidos pela IMF, que utilizou um painel de anticorpos monoclonais para as várias linhagens medulares. No período compreendido entre 2000 e 2010 foram estudados 87 pacientes (64 adultos e 23 crianças) oriundos do HUPE/UERJ e IPPMG/UFRJ e 46 controles (23 adultos e 20 crianças). Todos os doentes realizaram mielograma, biópsia óssea, citogenética, citoquímica e estudo imunofenotípico. Segundo os critérios da OMS 50 adultos foram classificados como SMD, 11 como LMA-rMD e 3 LMMC. Entre as crianças 18 eram SMD, 2 LMA e 3 LMMJ. Os pacientes adultos com SMD foram divididos em alto risco (n=9; AREB-1 e AREB-2) e baixo risco (n=41; CRDU, CRDM, CRDM-SA, SMD-N e SMD-5q). As crianças com SMD em CR (n=16) e AREB (n=2). Anormalidades clonais recorrentes foram encontradas em 22 pacientes adultos e em 7 crianças. Na análise de IMF foi utilizada a metodologia da curva ROC para a determinação dos valores de ponto de corte a fim de identificar os resultados anormais dos anticorpos monoclonais nos pacientes e nos controles, permitindo determinar a sensibilidade e especificidade desses em cada linhagem. A IMF foi adequada para a análise em todos os pacientes e 3 ou mais anormalidades foram encontradas. A associação da IMF...

ABSTRACT

Myelodysplastic syndrome (MDS) is characterized by having a dysplastic hematopoiesis, cytopenias and risk of progression to acute myeloid leukemia. The diagnosis is based on clinical and cytomorphologic findings in bone marrow (BM) and cytogenetics. In the initial phase of when the BM is hypocellular, diagnosis is difficult and often with normal karyotype. The flow cytometry immunophenotyping (FCI) analysis has been broadly used in adult MDS cases but is rarely in pediatric MDS. The objectives of this work were to study MDS cases and correlated diseases (AML with myelodysplasia-related changes; chronic myelomonocytic leukemia - CMML and juvenite myelomonocytic leukemia - JMML) and to correlate laboratorial data to FCI using a panel of monoclonal antibodies for the various marrow lineages in both adult and children. In the period between 2000 and 2010, 87 patients were studied (64 adults and 23 children) coming from HUPE/UERJ and IPPMG/UFRJ and 46 controls (26 adults and 20 children). All patients were submitted to myelogram, bone marrow biopsy, cytogenetic, cytochemistry and immunophenotypic study. According to WHO criteria 50 adults were classified MDS, 12 AML and 3 CMML. Among the children there were 18 MDS, 2 AML, and 3 JMML. MDS adult patients were subdivided into high risk (n=9; RAEB-1 and RAEB-2) and low risk (n=41; RCUD, RCMD-RS, MDS-U and MDS-5q). MDS children were classified as RCC (n=16) and RAEB (n=2). Clonal abnormalities were found in 22 (35%) adult patients and 7 (30%) children. In the analysis of FCI methodology ROC curve was used for determination of cut off abnormalities at monoclonal antibodies in patients and controls which allowed to estimate the sensitivity and specificity of each strain. The FCI was suitable for analysis in all patients and 3 or more abnormalities were found. The association of the FCI increased the sensitivity of morphological analysis in the erythroid lineage from 70 to 97% in adults and from 59 to 86% in children...