Estudo de populações clonais provenientes de trypanosoma cruzi, isolada de área endêmica da doença de chagas, após longa permanência em laboratório / Study of clonal populations of Trypanosoma cruzi provenientes, isolated from an endemic area of Chagas' disease, after a long stay in the laboratory

RESUMO

A cepa 21 SF, do Trypanosoma cruzi, oriunda de área endêmica de São Felipe-Bahia, de biodema II e zimodema 2, mantida em laboratório por 15 anos com características estáveis, foi clonada neste trabalho, por isolamento de um parasita, obtendo-se cinco clones que, subclonados, deram origem a 14 subclones. Cada clone ou subclone sofreu quatro passagens sucessivas em camundongos Suíços. A quinta passagem foi utilizada para o estudo biomorfológico e preparação de culturas para análises isoenzimática e do kDNA do T. cruzi. As isoenzimas analisadas foram Fosfoglicomutase, Glicose Fosfato Isomerase, Alanina Aminotransferase e Aspartato Aminotranferase. O kDNA foi analisado pelo estudo comparativo dos RFLP (Restriction Fragments Lenght Po/ymorphism), resultantes da digestão, por endonucleases de restrição, do DNA amplificado da região variável do minicírculo. Os resultados obtidos evidenciaram similaridade dos caracteres biológicos representados por a) curvas parasitêmicas com infecção inicial a partir do 7Q dia e piques irregulares entre o 12Q e o 20Q dia da infecção, característicos de cepas com biodema li; b) morfologia dos tripomastigotas sanguícolas, com predomínio de formas delgadas no 7Q dia da infecção e das formas largas no 10Q e 14Q dias desse processo; c) índices de mortalidade dos animais infectados, variando de acordo com a virulência das amostras. A caracterização isoenzimática evidenciou identidade entre o perfil zimodêmico da cepa e os perfis dos vários clones e subclones. O estudo comparativo dos RFLP apresentou percentuais de homologia variando de 67 a 100% entre a cepa e os clones, 76 a 97% entre os diversos clones e 79 a 100% entre os clones e os seus subclones. A análise conjunta de todos os aspectos sugere a predominância de clones na cepa 21 SF, responsáveis pela manutenção da estabilidade dos seus caracteres.