Otimização e validação de metodologia analítica para determinação de flavonóis e flavonas por CLAE em pólen apícola utilizando-se análise de superfície de resposta / Optimization and validation of HPLC methodology for determining flavonols and flavones in bee pollen by surface methodology

RESUMO

Foi otimizada a metodologia analítica para determinar quatro flavonóis miricetina (M), quercetina (Q), kanferol (K) e isoramnetina (I); e duas flavonas luteolina (L) e apigenina (A) em amostras de pólen apícola desidratado produzidas em três estados brasileiros Bahia (BA), São Paulo (SP) e Santa Catarina (SC). Delineamento Composto Central Rotacional (DCCR) foi utilizado para investigar os efeitos da concentração de HCl e do tempo de hidrólise sobre a concentração de cada flavonoide. A condição ótima encontrada para extração/hidrólise dos flavonoides estudados foi 1,0M HCl/30 minutos. A melhor separação dos flavonoides foi conseguida com a coluna de fase reversa Symmetry C18 e fase móvel de metanol tetrahidrofurano água(265717), acidificados com 0,3 de ácido fórmico em corrida isocrática (CLAE). As curvas-padrão apresentaram coeficientes de correlação superiores a 0,99. Os limites de detecção foram de 1,04, 0,88, 0,89,1,64, 0,82 e 1,19 μg/mL respectivamente para M, L, Q, A, I e K.