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Eficacia experimental de anticuerpos IgY producidos en huevos, contra el veneno de la serpiente peruana Bothrops atrox / Experimental efficacy of IgY antibodies produced in eggs against the venom of the Peruvian snake Bothrops atrox
Mendoza, Julio C.; Vivas, Dan; Rodríguez, Edith; Inga, Rosio; Sandoval, Gustavo; Lazo, Fanny; Yarlequé, Armando.
  • Mendoza, Julio C.; Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Ciencias Biológicas. Laboratorio de Biología Molecular. Lima. PE
  • Vivas, Dan; Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Ciencias Biológicas. Laboratorio de Biología Molecular. Lima. PE
  • Rodríguez, Edith; Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Ciencias Biológicas. Laboratorio de Biología Molecular. Lima. PE
  • Inga, Rosio; Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Ciencias Biológicas. Laboratorio de Biología Molecular. Lima. PE
  • Sandoval, Gustavo; Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Ciencias Biológicas. Laboratorio de Biología Molecular. Lima. PE
  • Lazo, Fanny; Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Ciencias Biológicas. Laboratorio de Biología Molecular. Lima. PE
  • Yarlequé, Armando; Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Facultad de Ciencias Biológicas. Laboratorio de Biología Molecular. Lima. PE
Rev. peru. med. exp. salud publica ; 29(1): 69-75, enero-mar. 2012. ilus
Article in Spanish | LILACS, LIPECS | ID: lil-625606
RESUMEN
Objetivos. Desarrollar un protocolo de inmunización para producir inmunoglobulinas IgY de origen aviar contra el veneno de la serpiente peruana Bothrops atrox y evaluar la capacidad neutralizante. Materiales y métodos. Se inmunizaron seis gallinas de postura de la raza hy line brown con 500 μg/dosis de veneno de B. atrox en un periodo de dos meses. Cada semana, los huevos fueron colectados para el aislamiento de inmunoglobulinas IgY a partir de la yema, usando dos pasos consecutivos con αcido caprνlico y sulfato de amonio. La detecciσn de anticuerpos se realizσ por inmunodifusiσn doble mientras que el tνtulo y reactividad cruzada se determinaron por las técnicas de ELISA y Western blot. El cálculo de DL50 y de la DE50 del antiveneno IgY producido se realizó utilizando el método de Probits. Resultados. La masa de anticuerpos aislados fue de 8,5 ± 1,35 mg de IgY/mL de yema. Asimismo, la DE50 del antiveneno aviar fue calculada en 575 μL de antiveneno/mg de veneno. Adicionalmente, los ensayos de reactividad cruzada mostraron que el veneno de B. atrox comparte mas epνtopes comunes con el veneno de B. brazili (47%) que con otros veneno del mismo género, en tanto que los venenos de Lachesis muta (19%) y Crotalus durissus (12%) mostraron una baja reactividad cruzada. Conclusiones. Se ha obtenido IgY purificada contra el veneno de B. atrox con capacidad neutralizante y se ha demostrado su utilidad como herramienta inmunoanalítica para evaluar la reactividad cruzada con venenos de otras especies.
ABSTRACT
Objectives. To develop an immunization protocol in order to produce avian IgY immunoglobulins against Bothrops atrox Peruvian snake venom and to evaluate its neutralizing capacity. Materials and methods. Six Hy Line Brown hens were immunized each two weeks using 500μg/doses of B. atrox venom in a period of two months. Each week, eggs were collected for IgY isolation from yolk using two consecutive steps with caprilic acid and ammonium sulfate. Detection of IgY anti-B. atrox were performed by double immunodiffusion, whereas title and cross-reactivity were analyzed using ELISA and Western Blot technics, respectively. Furthermore, letal dose (DL50) and Medium Effective Dose (DE50) were obtained by Probit analysis. Results. As a result of this protocol, chicken IgY’s were obtained in a concentration of 8,5 ± 1,35 mg/yolk mL. DE50 from avian antivenom was 575 μL/venom mg. Cross-reactivity studies showed Bothrops atrox venom share more commom epitopes with Bothrops brazili (47%) than others Bothrops venoms showing Lachesis muta (19%) and Crotalus durissus (12%) venoms a low crossing reactivity, instead. Conclusions. Using this procedure, we could purify chicken IgY with a neutralizant capacity of B. atrox venom which is comparable to the antivenom of equine origin and demonstrate its capacity as a immunoanalitical tool to evaluate the cross reactivity with others peruvian snakes.
Subject(s)


Full text: Available Index: LILACS (Americas) Main subject: Ovum / Immunoglobulins / Antivenins / Bothrops / Crotalid Venoms Limits: Animals Language: Spanish Journal: Rev. peru. med. exp. salud publica Year: 2012 Type: Article Institution/Affiliation country: Universidad Nacional Mayor de San Marcos/PE

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