Exploración del efecto protector frente a radicales libres de derivados de la uva (Vitis vinifera L. Cv. Tannat) en Saccharomyces cerevisiae / Analysis of a putative protection against free radicals by grape derivatives (Vitis vinifera L. Cv. Tannat) in Saccharomyces cerevisiae

RESUMEN

Se exploró un posible efecto protector del genoma por parte de un derivado de la uva (vino Tannat). Se utilizaron poblaciones celulares haploides y diploides de Saccharomyces cerevisiae como modelo eucariota. Muestras celulares se expusieron a H2O2 en medio nutriente. El ADN se analizó por densitometría láser, luego de su aislamiento y separación por electroforesis con campos pulsados. Se aplicó la distribución de Poisson para la determinación de roturas dobles. El número de roturas dobles del ADN y la frecuencia mutagénica aumentaron en función de la dosis de H2O2, disminuyendo la probabilidad de sobrevida. La combinación de H2O2 con vino Tannat aumentó significa-tivamente la probabilidad de sobrevida y disminuyó el número de roturas dobles. No se observó efecto mutagénico por el vino Tannat. Estos efectos pudieron simularse utilizando altas concentraciones de α-tocoferol. Los resultados indican que un derivado de Vitis vinifera puede, en ciertas condiciones, disminuir las dobles roturas de ADN producidas por el H2O2 e incrementar las probabilidades de sobrevida celular. Los blancos involucrados podrían ser, entre otros, componentes intracelulares de las cascadas redox y/o enzimas de reparación del ADN.

ABSTRACT

The aim of this work was to analyse a possible genome protection provided by a grape derivative (Tannat wine) in yeast cell populations exposed to H2O2. Haploid and diploid strains of Saccharomyces cerevisiae were used as eukaryotic model. Cell samples were exposed to H2O2 in a nutrient medium. Chromosomal DNA was analysed after isolation and separation by pulsed field electrophoresis. Double strand breaks were determined by laser densitometry and application of Poisson distribution. Both haploid and diploid cells showed H2O2 dose dependent DNA fractionation, as well as an increase of lethal -and mutation- events. Upon combination of the Tannat wine and H2O2 a significant decrease of double strand breaks was observed, in association with an increase in surviving fractions. No mutagenic effect was observed after wine exposure. Part of the observations regarding protective wine effect were simulated by exposure to high concentrations of α-tocopherol. Present results indicate that a grape derivative could act as a genome protector increasing cell survival probabilities. Among others, the involved molecular targets could be components of transduction redox cascades as well as DNA repair enzymes.