Humoral response of paracoccidioidomycosis sera in hamsters with different Venezuelan isolates

ABSTRACT

Humoral response of paracoccidioidomycosis sera in hamsters with different Venezuelan isolates. Paracoccidioidomycosis (PCM) is a progressive systemic mycosis caused by the fungus Paraccocidioides brasiliensis (Pb), endemic to Venezuela and Latin America. In this study, eight different Venezuelan isolates obtained from patients with PCM, were inoculated intraperitoneally in Syrian hamsters (Cricetus auratus) and studied by immune-serum. Each strain was collected by gently scraping the surface of the culture medium (Sabouraud Dextrose Agar) and suspended in 3ml of 0.15 M phosphate-buffered saline. The antigen obtained was called Paraccocidioides brasiliensis Crude Antigen (CAP). Immunoblotting results showed that the immune-sera from hamsters recognized at least 3 bands one over 200 kDa, and two of 80 and 15-20 kDa. This study suggests that IgG anti-CAP can reveal a significant variability in the eight Venezuelan isolates. Sera from 88 infected hamsters were evaluated by ELISA with eight different CAPs and Western blot with CAP 37383. ELISA results showed that, the antigen of the virulent isolate 37383 had the highest percentage (38%) of positivity, while the non-virulent isolate 1458 had the lowest one (13.6%). Furthermore, scanning densitometry revealed that the isolate 37383 had less bands than the non-virulent isolates. These results suggest that the ELISA test with CAP 37383 can detect circulating antibodies, and that this virulent isolate may be useful for the diagnosis of PCM, and to monitor disease responses to treatments. Rev. Biol. Trop. 57 (3) 505-513. Epub 2009 September 30.

RESUMEN

La Paracoccidioidomicosis (PCM), es una micosis sistémica causada por el hongo Paraccocidioides brasiliensis (Pb), endémica en Venezuela y Latino América. En este estudio ocho diferentes aislados venezolanos, obtenidos de pacientes con PCM, fueron inoculados intraperitonealmente en hámsteres y fueron estudiados por ELISA e inmunoblotting. Los antígenos obtenidos de P. brasiliensis fueron llamados, Antígeno Crudo (CAP). Los resultados del immunoblotting mostraron que los sueros inmunes de hámsteres reconocieron al menos tres bandas una sobre 200, y otras de 80, y 15-20 kDa. Este estudio sugiere que la IgG anti-CAP muestra una variabilidad en los ocho aislados Venezolanos. Sueros de 88 hámsteres infectados fueron evaluados usando ELISA, el antígeno del aislado virulento 37383 mostró el más alto porcentaje de positividad (38%) en los sueros de los hámsteres estudiados. El aislado novirulento 1458 mostró un porcentaje bajo de positividad (13.6%). Además, un escaneo densitométrico reveló que el aislado 37383 tiene menos bandas que el otro aislado no-virulento. Por lo tanto, estos resultados sugieren que el ensayo de ELISA con CAP 37383 puede detectar anticuerpos circulantes y este aislado virulento puede ser útil para el diagnostico de PCM, y para el monitoreo de la respuesta al tratamiento de la enfermedad.