Aumento dos níveis de LDLox induzem maior formação de células espumosas in vitro / Increased levels of oxLDL induce higher foam cells formation in vitro

RESUMO

Inúmeras evidências sustentam a hipótese de que a modificação oxidativa da LDL contribui para o desenvolvimento e progressão da aterosclerose em uma variedade de modelos animais e que as células espumosas constituem um evento crucial no desenvolvimento da lesão aterosclerótica. A LDL oxidada tem uma ação quimioatraente sobre os monócitos, induzindo a transformaçãode macrófagos em células espumosas. Neste trabalho, foi desenvolvido um protocolo simples e reproduzível de cultura de células mononucleares humanas, o qual foi utilizado para avaliação da capacidade aterogênica da LDL oxidada comparada à LDL nativa naformação de células espumosas com ativação espontânea dos macrófagos. A partir do sangue de 10 indivíduos normolipidêmicos, obteve-se a LDL por processo de ultracentrifugação sendo a mesma oxidada in vitro na presença de íons cobre. Monócitos diferenciaram-se em macrófagos e foram incubados com LDL nativa e oxidada em diferentes concentrações. Houve formação decélulas espumosas apenas em macrófagos estimulados com LDL oxidada, variando quantitativamente de acordo com a sua concentração.Concluiu-se que este protocolo de estudo, além de possibilitar a utilização de macrófagos humanos, permitiu a redução do tempo de incubação da cultura. Paralelamente, demonstrou-se que a formação de células espumosas é dependente da extensão do grau deoxidação da LDL

ABSTRACT

Much evidence sustains the hypothesis that oxidative modification of low-density lipoprotein (LDL) contributes to the development and progression of atherosclerosis and that foam cells constitute a crucial event in the development of the atheroscleroticlesion. Oxidized LDL (oxLDL) presents a chemotatic action on monocytes, inducing the transformation of macrophages into foam cells. In this work, a simple reproducible protocol for culturing human mononuclear cells was developed to evaluate the atherogeniccapacity of oxLDL compared to native LDL in the formation of foam cells. Monocytes differentiate into macrophages when stimulatedwith native and oxidized LDL at different concentrations. Foam cell formation only occurred in macrophages stimulated by oxLDL, which varied quantitatively according to its concentration. This study protocol, besides making the use of human macrophages possible, permitted a reduction in culture incubation time. Moreover, the study demonstrated that foam cell formation is dependent on the degree of LDL oxidation