Impacto da ausência da galectina-3 sobre o curso da infecção experimental pelo Trypanosoma cruzi / Impact absence of galectin-3 on the course of experimental infection with Trypanosoma cruzi

RESUMO

A galectina-3, lectina solúvel ligante de _-galactosídeos, é expressa em uma variedade de células do sistema imunológico, como macrófagos e linfócitos e, é capaz de modular a resposta imune ao participar de processos como ativação, diferenciação e produção de citocinas. O Trypanosoma cruzi é o agente etiológico da Doença de Chagas e os estudos relacionados à infecção ainda são alvo de investimentos por ser um problema de saúde pública, com ausência de vacinas eficazes e esquemas terapêuticos que ajam em todas as etapas da doença. O sistema imune, inato e adaptativo, é crucial no controle da infecção. Neste estudo avaliamos a participação da galectina-3 na infecção experimental pelo T.cruzi. Camundongos selvagens (WT) e deficientes para o gene da galectina-3 (Gal-3-/-) foram infectados por T.cruzi, cepa Tulahuén (103 formas tripomastigostas/camundongo). Os níveis de citocinas (IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IFN-gamma e TNF) foram determinados por ELISA no soro e no sobrenadante de culturas de linfócitos T ativados obtidos de linfonodos subcutâneos (LSC) e baço. A celularidade do LSC e baço e a expressão das moléculas CD4, CD8, CD19, CD25 e FoxP3 nos linfócitos foram analisadas por contagem em câmara de Neubauer e citofluorimetria, respectivamente. A ativação in vitro dos linfócitos T foi realizada com 10 μg/mL de anticorpo anti-CD3. Para avaliar a susceptibilidade dos macrófagos à infecção, macrófagos peritoneais de animais Gal-3-/- e WT foram infectados in vitro por 3 horas, fixados e corados. Nossos resultados mostraram que camundongos Gal-3-/- são mais susceptíveis à infecção pelo T.cruzi, apresentando alta mortalidade e parasitemia aumentada. Além disso, verificamos que os animais Gal-3-/- infectados apresentaram menor expansão celular dos LSC e baço, com diminuição dos números absolutos de linfócitos CD4+ e CD8+ e CD19+ no LSC e de CD19+ no baço em comparação aos camundongos WT infectados. As análises dos sobrenadantes de linfócitos T ativados com anti-CD3 e soros de camundongos Gal-3-/- infectados sugerem uma diminuição dos níveis de secreção de IL-4, IL-5 e aumento de IFN-gamma. De modo interessante, dados preliminares mostraram que macrófagos Gal-3-/- infectados parecem ser menos efetivos em eliminar os parasitos intracelulares do que os macrófagos de animais WT. Nossos resultados sugerem que a galectina-3 é importante na modulação da resposta do hospedeiro contra o T. cruzi, com implicações na susceptibilidade à infecção.