Determinação de paracetamol (acetaminofenol) em produtos farmacêuticos usando um biossensor de Polifenol oxidase, obtida de extrato bruto de banana nanica (Musa acuminata) / Spectrophotometric determination of paracetamol in pharmaceutical products using a biosensor of Polyphenol oxidase, obtained of crude extract of stunded banana (Musa acuminata)

RESUMO

Introdução - Extrato bruto de banana nanica (Musa acuminata); melhor fonte de enzima Polifenoloxidase (PFO) [EC.1.14.18.1] foi estudado como material biocatalítico para a oxidação aeróbica de substratos fenólicos. Material e Métodos - Foi estudada a extração da PFO dessa fonte. A atividade da enzima PFO e proteína total foram determinadas nesse extrato. Um biossensor amperométrico foi construído usando 100 U de PFO proveniente do extrato bruto de banana nanica, imobilizada sobre uma membrana de teflon (Celgard 2400) com o uso do reagente bifuncional glutaraldeído 2,5% m/V. Após secagem, esta membrana enzimática foi acoplada na extremidade de um eletrodo de oxigênio. Esse biossensor foi usado na determinação de compostos fenólicos; utilizado no estudo da determinação do teor de paracetamol em formulações farmacêuticas como Tandrilax, Cefalium, Diatyl, Vick pirena e Descon. Comparando os resultados obtidos pelo método amperométrico proposto com o oficial espectrofotométrico. Resultados - Os medicamentos analisados por amperometria apresentaram valores compatíveis com o da farmacopéia, observando-se seletividade do método proposto. Conclusões - Verificou-se que a porcentagem de erro apresentou valores menores que 1% estando, portanto, de acordo com o procedimento padrão oficial. A vantagem do método amperométrico apresentado é possuir baixo custo, rapidez nas determinações e boa sensibilidade comparado com métodos cromatográficos de determinação desse fármaco.

ABSTRACT

Introduction - Partial purificated extract of stunded banana (Musa acumunata), the best source of enzyme Poliphenol oxidase (PPO) [EC.1.14.18.1] was studied as biocatalitic material to the aerobic oxidation of phenolics substrates using an amperometry biosensor with PPO immobilized. Material and Methods - The extraction of PPO was studied in the source, the partial purification of this crude extract using ammonium sulphate (40%), that precipitate the enzyme excess presents in this extract with posterior dialysis. After it was determinated the total activity and proteins in the two extracts. An amperometric biosensor was builded using 50 U of PPO proceeding of purificated partial extract of stunded banana; immobilized on a Teflon membrane (Celgard 2400), with the use of the reagent glutaraldeyde 2,5% m/v. After drying, this enzymatic membrane was copled in the extremity of an oxygen electrode. This biosensor was used in the determination of phenolics in urine samples of persons that use drugs, metabolizing phenols by amperometry and by spectrophotometry. Results - In the urine samples, was possible to notice that persons that use L- Dopa shows greather quantity of phenols than persons that use amphetamines. Conclusions -The percentage of error in the samples studied was minor that 3%, using the crude extract and purificated partialment, using the spectrophotometric standard method, showing the efficiency of the amperometric method used with or without the enzymatic purification.