Efecto de la administración de espironolactona sobre la pérdida de podocitos y la progresión de la nefropatía diabética experimental / Effects of spironolactone administration on the podocytes loss and progression of experimental diabetic nephropathy

RESUMEN

Objetivos. Evaluar el efecto de espironolactona (SPL) sobre la pérdida de los podocitos durante la progresión de la nefropatía diabética (ND) experimental. Materiales y métodos. Aleatoriamente un grupo de ratas macho Holtzman recibieron estreptozotocina (grupo diabético) o citrato buffer (grupo control). Las ratas diabéticas fueron tratadas con SPL (50 mg/kg/día). El área glomerular y la celularidad fueron evaluadas por métodos histomorfométricos. La lesión y pérdida de podocitos fue evaluada por la expresión de desmina y Wt-1, respectivamente. La expresión génica del TGF-β1 se evaluó mediante RT-PCR. Resultados. Los niveles de glucosa, el área glomerular, la expansión mesangial y el contenido de colágeno se incrementaron significativamente en las ratas diabéticas. La administración de SPL previno estos cambios sin modificar los niveles de glucosa. La inmunotinción para Wt-1 se redujo significativamente, mientras que la inmunotinción para desmina se incrementó drásticamente en las ratas diabéticas. El tratamiento con SPL previno el incremento de expresión de desmina y la pérdida de expresión de Wt-1. Asimismo, la administración de SPL previno el incremento de la expresión del mRNA del TGF-β1 en las ratas diabéticas. Conclusiones. El tratamiento con SPL, a través de efectos glucosa independientes, atenúa la perdida de podocitos y la progresión de los cambios morfológicos de la ND. Los presentes resultados sugieren que estos efectos son mediados, al menos en parte, por la inhibición de la la expresión del mRNA del TGF-β1.

ABSTRACT

Objectives. Evaluate the effect of spironolactone (SPL) on the loss of podocytes during the progression of experimental diabetic nephropathy (DN). Materials and methods. A group of male Holtzman rats randomly received streptozotocin (diabetic group) or a buffer citrate (control group). Diabetic rats were treated with SPL (50 mg/kg/day). The glomerular area and the cellularity were evaluated by histomorphometric methods. The injury and loss of podocytes was assessed by desmin expression and Wt-1, respectively. The gene expression of TGF-β1 was assessed by RT-PCR. Results. Glucose levels, the glomerular area, the mesangial expansion and collagen content increased significantly in diabetic rats. The administration of SPL prevented these changes without changing glucose levels. Immunostain for Wt-1 decreased significantly while immunostain for desmin increased dramatically in diabetic rats. Treatment with SPL prevented the increase of desmin expression and the loss of Wt-1 expression. Furthermore, the administration of SPL prevented the increase of TGF-β1 mRNA expression in diabetic rats. Conclusions. Treatment with SPL, through independent glucose effects, reduces the loss of podocytes and the progression of DN morphological changes. These results suggest that these effects are mediated, at least in part, by the inhibition of TGF-β1 mRNA expression.