Avaliação do papel funcional do gene NDRG4 na tumorigênese de mama / Evaluation of the functional role of gene NDRG4 in breast tumorigenesis

RESUMO

Em trabalho anterior realizado pelo nosso grupo, descrevemos que o gene NDRG4 se encontra silenciado em linhagens tumorais de mama devido a presença de metilação na sua região promotora. Neste trabalho, exploramos o papel do silenciamento do gene NDRG4 na tumorigênese da mama. Em um primeiro momento, investigamos a associação entre a presença de metilação na região promotora do gene NDRG4 em 61 amostras de tumores de mama e os dados clínico-patológicos das pacientes. Observamos uma associação estatisticamente significativa entre a presença de metilação do DNA na região promotora do gene NDRG4 e fatores de pior prognóstico, tais como número de linfonodos positivos (p=0,025), níveis elevados da proteína p53 (p=0,014) e o tamanho do tumor (p=0,036); bem como com uma menor taxa de sobrevida livre de metástase em 10 anos (p=0,001). Em análise multivariada, a presença de metilação do DNA na região promotora do gene NDRG4 se mostrou um fator independente de prognóstico para sobrevida livre de mestástase (HR=5.5 e p=0.006). Paralelamente, realizamos o silenciamento do gene NDRG4 na linhagem de tumor de mama MCF7 utilizando a metodologia de shRNA. Variantes celulares, silenciadas para o gene NDRG4, apresentaram uma redução significativa na taxa de proliferação e na capacidade de formação de colônias isoladas e um aumento significativo na capacidade de migração. No entanto, não foram observadas diferenças significativas na capacidade de adesão e na susceptibilidade a taxanos dos clones silenciados