Análise crítica dos métodos moleculares para detecção do papilomavírus humano: revisão da literatura / Molecular methods for human papillomavirus detection: literature review

RESUMO

O papilomavírus humano (HPV) é um vírus que infecta o epitélio cutâneo e das mucosas. Células infectadas por este vírus perdem a capacidade de controlar o ciclo celular e passam a proliferar descontroladamente gerando alterações displásicas que podem progredir para lesões malignas. Existem mais de 200 tipos de HPV e entre eles aqueles que apresentam maior ou menor risco de causar câncer. Dessa forma, o HPV pode ser classificado como sendo de baixo risco ou alto risco. Os métodos mais utilizados em pesquisa para análise molecular do HPV é a hibridização in situ (ISH), reação em cadeia da polimerase (PCR) que varia desde a PCR alelo específica, passando pelo tipo Nested e a PCR multiplex, e a mais nova técnica baseada na tecnologia de microarray. A maioria destes testes é realizada apenas em centros de pesquisa, e não rotineiramente na clínica. Por outro lado, o teste de captura híbrida II para HPV, baseado na hibridização do DNA, é comercialmente disponível. As técnicas para detecção do DNA do HPV e sua genotipagem variam quanto a sua sensibilidade e especificidade. Técnicas que utilizam sondas como a hibridização in situ e o Southern blotting são as menos sensíveis para detecção da sequência do DNA, enquanto que as mais sensíveis são as técnicas que utilizam a amplificação do DNA alvo, como a PCR e a qPCR. À medida que a tecnologia avança, as técnicas moleculares vão se aprimorando para a detecção do HPV. O objetivo final é desenvolver uma metodologia de baixo custo que apresente resultados rápidos e eficientes.

ABSTRACT

The human papillomavirus (HPV) is a virus that infects the skin and mucosal epithelium. Infected cells lost the ability to control cell cycle and begin to proliferate uncontrollably causing dysplastic alterations that can progress to malignant lesions. There are over 200 types of HPV with higher or lower risk of causing cancer. Thereby, HPV can be classified as high risk or low risk. The methods used in research for molecular analysis of HPV is the in situ hybridization (ISH), polymerase chain reaction (PCR) that varies from the allele specific PCR, Nested, PCR multiplex, and the newest technique based on microarray technology. Most of these tests are performed only in research centers, and not routinely in the clinic. An exception is the Hybrid Capture II test for HPV. The detection techniques of HPV and its genotyping vary in their sensitivity and specificity. Techniques that use probes, as in situ hybridization and Southern blotting are less sensitive for detection of DNA sequence, while the most accurate are the techniques based on DNA amplification, such as PCR and qPCR. As technology advances, molecular techniques become more accurate for the detection of HPV. The ultimate goal is to develop an inexpensive method to provide rapid and efficient results.