Identificación de fracciones electroforéticas de unión a IgE en extractos de Ascaris sp. / Identification of electrophoretic fractions of the IgE-binding in Ascaris sp. extracts

RESUMEN

Introducción: Ascaris lumbricoides infecta a una cuarta parte de la población mundial, constituyéndose en un problema de salud pública. La ascariosis humana está asociada con morbilidad crónica y aguda, especialmente en niños. Recientemente se ha planteado la existencia de anticuerpos IgE en el suero sanguíneo de pacientes alérgicos, que tienen reacción cruzada con alérgenos de artrópodos domésticos y antígenos de Ascaris sp., esto podría aumentar el número de muestras seropositivas a Ascaris sp, en poblaciones sensibilizadas a los ácaros del polvo intradomiciliario. Objetivo: Producir extractos de cuerpo entero de A. lumbricoides y A. suum, evaluar sus propiedades antigénicas y capacidad de unión a la IgE de pacientes alérgicos al ácaro Dermatophagoides pteronyssinus. Métodos: Los extractos fueron obtenidos por homogenización y lisis osmótica de las células en presencia de Tween-20 e inhibidores de proteasas. El perfil de proteínas de cada extracto fue identificado por electroforesis en geles de poliacrilamida con dodecilsulfato sódico (SDS-PAGE). La reactividad antigénica se determinó por Western blotting usando once sueros de pacientes alérgicos con diagnóstico de asma. Resultados: SDS-PAGE reveló 20 fracciones electroforéticas mayoritarias (20-200 kDa). Western Blotting reveló diferencias en el perfil de proteínas de unión a la inmunoglobulina IgE de los extractos. Conclusiones: Proteínas del cuerpo entero de A. lumbricoides y A. suum mostraron un perfil de unión a IgE diferente en el Western blotting, con sueros de pacientes alérgicos al ácaro D. pteronyssinus, sugiriendo la presencia de marcadores especie específicos entre los dos parásitos, los cuales podrían usarse en futuras investigaciones biomédicas.

ABSTRACT

Background: Ascaris lumbricoides infects a quarter of the world's population, thus becoming a public health problem. Human ascariasis is associated with chronic and acute morbidity, especially in children. Recently, it has been stated that the existence of IgE antibodies in the blood serum of allergic patients that have cross reactivity with domestic arthropods and antigens of Ascaris sp. could increase the number of samples seropositive for Ascaris sp. in populations who are sensitized to house dust mites. Objective: To produce whole body extracts of both A. lumbricoides and A. suum, and to evaluate their antigenic properties and the IgE-binding capacity in patients allergic to the house dust mite (Dermatophagoides pteronyssinus). Methods: The extracts were obtained by homogenization and osmotic lysis in the presence of Tween-20 and protease inhibitors. The protein profile of each extract was identified by sodium dodecyl sulphate-polyacrylamide gel elctrophoresis (SDS-PAGE). Antigen reactivity was determined by Western blotting, using eleven sera from allergic patients with the diagnosis of asthma. Results: SDS-PAGE revealed 20 major electrophoretic fractions (20-200 kDa). Western Blotting revealed differences in the protein profile of the immunologlobulin IgE-binding of the extracts. Conclusions: Whole body proteins of both A. lumbricoides and A. suum showed a different IgE-binding profile in the Western blotting, with sera from patients allergic to the D. pteronyssinus mite, suggesting the presence of species-specific markers between the two parasites, which could be used in further biomedical research.