Stryphnodendron adstringens (Mart. ) Coville (Fabaceae) proanthocyanidins quantitation by RP-HPLC

ABSTRACT

Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (barbatimão) is a tree belonging to the Fabaceae family, and it is commonly found in the southeastern Brazilian cerrado. The stem bark of this tree is traditionally used as an anti-inflammatory and antiseptic agent to treat leucorrhea and diarrhea, as well as to promote wound healing (owing to the presence of proanthocyanidins). Proanthocyanidins were obtained from the ethanolic extract of S. adstringens stem bark and assessed by reversed phase-high performance liquid chromatography with an ultraviolet/diode array detector. The identified compounds included gallic acid, catechin, gallocatechin (GC), epigallocatechin, and epigallocatechin gallate (EGCG). The selected markers, GC and EGCG, were simultaneously used for chromatographic validation (linearity range 30-330 ng, equivalent to 3-33 µg/mL; r>0.998). The method showed precision (intra-day relative standard deviation [RSD] 1.72% for GC; 1.16% for EGCG; inter-day RSD 1.74%-2.60% for both markers), accuracy, robustness, and selectivity. The limits of detection and quantitation were 0.29 µg/ml and 0.89 µg/ml for GC, and 0.88 µg/mL and 2.67 µg/mL for EGCG, respectively. In addition, S. obovatum was evaluated and showed an average of 12.2 µg/mL for GC (equivalent to 1.22% w/w) and 14.2 µg/mL for EGCG (equivalent to 1.42% w/w) in the ethanolic extract. The quantitative results were compared to those obtained for S. adstringens, which showed that the markers are present in both species.

RESUMO

Stryphnodendron adstringens (Mart.) Coville (barbatimão) é uma árvore da família Fabaceae encontrada no cerrado do sudeste do Brasil. As cascas do caule das espécies são tradicionalmente utilizadas como agente antiinflamatório e antisséptico para o tratamento de diarreia e leucorreia, bem como para promover a cicatrização de feridas, devido à presença de proantocianidinas. Estas substâncias obtidas a partir do extracto etanólico (EE) de cascas do caule de S. adstringens foram avaliadas por cromatografia líquida de alta eficiência de fase reversa. As substâncias identificadas foram ácido gálico, catequina, galocatequina (GC), epigalocatequina e galato de epigalocatequina (EGCG). Os marcadores selecionados, GC e EGCG, foram utilizados simultaneamente para validação cromatográfica (intervalo de linearidade 30-330 ng, equivalente a 3-33 µg/mL, r>0,998). O método mostrou precisão (intra-dia DPR 1,72% para GC; 1,16% para EGCG; inter-dia DPR 1,74%-2,60% para ambos os marcadores), exatidão, robustez e seletividade. Os limites de detecção e de quantificação de 0,29 µg/mL e 0,89 µg/mL para a GC, e 0,88 ng/mL e 2,67 µg/mL para EGCG, respectivamente. Outra espécie (S. obovatum) avaliada, mostrou valores médios 12,2 µg/mL de GC (equivalente a 1,22% p/p) e 14,2 µg/mL de EGCG (equivalente a 1,42% p/p) encontrados no EE. Os resultados quantitativos comparam-se aos de S. adstringens e mostram que tais marcadores estão presentes em ambas as espécies.