Detection of macrophages infected with Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis in a cow with clinical stage IV of Johne's disease. A case report / Detección de macrófagos infectados con Mycobacterium avium subspecies paratuberculosis en una vaca en fase clínica IV de la enfermedad de Johne. Reporte de un caso / Detecção de macrófagos infectados com Mycobacterium avium paratuberculosis subespécie em uma vaca com uma fase clínica IV da doença de Johne. Um relato de caso

ABSTRACT

Anamnesis a six-year-old milking Holstein cow (Bos taurus taurus) was diagnosed with stage IV Johne's Disease (JD). Clinical and Laboratory findings: the cow suffered intermittent diarrhea during 6 months with no response to antibiotic treatment. Consequently, the cow was subjected to euthanasia. Treatment approach: antemortem milk and peripheral blood samples and postmortem colon, mediastinic, mesenteric lymph nodes, and spleen samples were processed for macrophages isolation. Total DNA was extracted from macrophages and used to diagnose IS900 of Mycobacterium avium paratuberculosis (MAP) through real time PCR. The MAP IS900 segment was successfully amplified from cells of all samples, indicating that these cells were MAP-infected macrophages. Conclusion: macrophages of cows suffering from JD can be used for amplification of the MAP IS900 segment.

RESUMEN

Anamnesis una vaca Holstein de 6 años de edad (Bos taurus taurus) presentó sintomatología de la fase IV de la enfermedad de Johne. Hallazgos clínicos y de laboratorio la vaca presentó diarrea intermitente durante 6 meses sin respuesta al tratamiento con antibióticos. En consecuencia, la vaca fue sometida a eutanasia. Esquema de tratamiento muestras de leche y de sangre periférica se tomaron ante-mortem; muestras de la mucosa del intestino, bazo y linfonodos mediastínico y mesentérico, se tomaron post-mortem, todas para aislamiento de macrófagos. El ADN total de los macrófagos fue usado para la amplificación del segmento IS900 de Mycobacterium avium paratuberculosis (MAP) por PCR en tiempo real. Conclusión: los macrófagos de vacas con la enfermedad de Johne pueden ser usados para la amplificación del segmento IS900 de MAP.

RESUMO

Anamnese uma vaca Holstein com 6 anos de idade (Bos taurus taurus) apresentou os sintomas da fase IV da doença de Johne. Achados clínicos e laboratoriais a vaca teve diarreia intermitente por seis meses sem resposta ao tratamento com antibióticos. Por conseguinte, a vaca foi submetida à eutanásia. Abordagem de tratamento amostras de leite e de sangue periférico foram retiradas ante-mortem, enquanto as amostras da mucosa intestinal, baço e linfonodos mesentéricos e mediastinais foram tomadas todas post-mortem para o isolamento de macrófagos. O ADN total de macrófagos foi utilizado para amplificação do segmento IS900 do Mycobacterium avium paratuberculosis (MAP) por PCR em tempo real. Conclusão: macrófagos isolados a partir de vacas com doença de Johne podem ser utilizados para a amplificação da segmento IS900 do MAP.