Obtención de anticuerpos contra angiotensina II / Obtention of antibodies against angiotensin II

RESUMEN

Se obtuvieron anticuerpos contra angiotensina II (ANG II) para medir la concentración de este octapétido por radioinmunoanálisis (RIA). La NG II se acopló a proteínas de alto peso molecular, se emulsionó con adyuvante de Freund y se inyectó intradérmicamente. Las cuatro primeras inmunozaciones se dieron a intervalos semanales. Las proteínas a las cuales se acopló el octapéptido para la primera, segunda, tercera y cuarta inmunización fueron: tiroglobulina, albúmina sérica bovina, ovoalbúmina y tiroglobulina, respectivamente. La quinta inmunización se dio doce semanas después con ANG II acoplada a hemocianina. El título del anticuerpo se determinó por RIA. Uno de los conejos inmunizados produjo un anticuerpo altamente específico, con un título de 1: 10,000 y una sensibilidad de 1.9 picogramos de ANG II. La especificidad del anticuerpo se evaluó midiendo el porcentaje en que este anticuerpo cruza péptidos relacionados estructuralmente. La reacción cruzada con [Sar, Tres] ANG II, [Sar, Gli] ANG II, [Sar, Ile] ANG II, [Val] ANG I y angiotensinógeno fue indetectable. La reacción cruzada con [Sar, Ala] ANG II, angiotensina III, [Des-Asp] ANG I, [Val] ANG II y angiotensina I fue de 3.3, 8.3, 0.2, 3.1 y 1.0% respectivamente. El anticuerpo obtenido es adecuado para medir directamente la ANG II en el plasma de ratas, así como de otras especies tales como el perro, el conejo, el ratón y el humano, cuya secuencia de aminoácidos es idéntica