Estudio taxonómico de aislamientos clínicos de Trichophyton en Rosario, Argentina / Taxonomic study of clinical isolates of Trichophyton in Rosario, Argentina

RESUMEN

Debido al pleomorfismo y la variabilidad cultural que presentan las especies del género Trichophyton, los métodos de identificación basados exclusivamente en caracteres morfológicos a menudo no son suficientes para su clasificación. El objetivo de este estudio fue probar un conjunto de métodos fenotípicos para identificar aislamientos fúngicos pertenecientes al género Trichophyton empleando una técnica de taxonomía molecular como método de referencia. Se utilizaron 56 aislamientos clínicos y 6 cepas de referencia, con los que se realizaron estudios macro y micromorfológicos, así como las siguientes pruebas bioquímicas y fisiológicas perforación del pelo in vitro, requerimientos nutricionales en medios agar Trichophyton, producción de ureasa y crecimiento en el medio agar púrpura de bromocresol-leche-glucosa (APBC-L-G). A su vez se realizó una PCR fingerprinting utilizando el cebador simple (GACA)4. Como resultado de la reacción de PCR se observaron perfiles específicos bien diferenciables para Microsporum canis, Epidermophyton fl occosum, Trichophyton rubrum y Trichophyton interdigitale, pero un mismo perfil para Arthroderma benhamiae y Trichophyton erinacei. Del total de los aislamientos clínicos evaluados, 39 coincidieron con el perfil de T. rubrum, 13 con el de A. benhamiae y 4 con el de T. interdigitale. El ensayo fenotípico más útil para diferenciar T. rubrum del complejo T. mentagrophytes fue la alcalinización del medio APBC-L-G. Con las pruebas fenotípicas se pudo diferenciar T. rubrum de los aislamientos del complejo T. mentagrophytes, pero no las especies pertenecientes a dicho complejo. La técnica molecular permitió caracterizar tanto los aislamientos de T. rubrum como los pertenecientes al complejo T. mentagrophytes, que en nuestro estudio correspondieron a T. interdigitale y Trichophyton sp. anamorfo de A. benhamiae.

ABSTRACT

Due to the pleomorphism and cultural variability displayed by species of the genus Trichophyton, the identification methods based solely on morphological features are usually insufficient for their classification. The goal of the present work was to test a set of phenotypic methods in order to identify fungal isolates that belong to the aforementioned genus. These methods were based on a molecular taxonomic technique used as standard. Clinical isolates (56) were used as samples along with 6 reference strains. Macro and micromorphological studies were performed as well as biochemical and physiological tests such as in vitro hair perforation, nutritional requirements in Trichophyton agar media, urease production and growth on bromocresol purple-milk solids-glucose (BCP-MS-G) agar. Additionally, PCR fingerprinting using the (GACA)4 primer was employed. As a result of the PCR method, specific profiles were observed for Microsporum canis, Epidermophyton floccosum, Trichophyton rubrum and Trichophyton interdigitale. Identical profiles were obtained for Arthroderma benhamiae y Trichophyton erinacei. Of the total number of clinical isolates, 39 matched the T. rubrum profile while 13 corresponded to A. benhamiae and 4 to T. interdigitale. The most useful phenotypic test to differentiate between T. rubrum and T. mentagrophytes complex strains was alkalinization of the BCP-MS-G medium. Phenotypic tests did not allow differentiation among the T. mentagrophytes complex species. On the other hand, the molecular technique allowed characterization of T. rubrum isolates as well as of those observed in our study and included in the T. mentagrophytes complex T. interdigitale and Trichophyton sp. , the anamorph of A. benhamiae.