Mantenimiento y transporte del Blastocystis sp. en condiciones de vitalidad / Maintenance and transport Blastocystis sp in conditions of vitality

RESUMEN

El Blastocystis sp es un protozoario con alta prevalencia en Venezuela. Es controversial por su papel patógeno y su gran variabilidad genética, relacionada con la dificultad de mantenerlo en condiciones de viabilidad fuera del hospedador. Se evaluó la utilidad de los medios de cultivo in vitro RPMI1640, TB1, MBD y MBDM para mantener la viabilidad del Blastocystis sp. Se seleccionaron 97 muestras de heces, 43 (44%) de las cuales resultaron positivas solo para Blastocystis sp y de 15 de ellas se purificaron los Blastocystis sp mediante gradiente (ficol-diatrizaoato de sodio). En cada medio de cultivo y en solución salina 0,85% (SSI) se inoculó1x103 parásitos por paciente y se evaluó la viabilidad mediante coloración con azul de tripano a las 24, 48 y 72 horas. Los resultados mostraron porcentajes de viabilidad a las 24 h en SSI de 2%, en RPMI1640 5%, en TB1 5%, MBD 24% y MBDM 40%. A las 48 h en SSI de 3%, en RPMI1640 4%, en TB1 4%, MBD 17% y MBDM 21%. A las 72 h en SSI 2%, en RPMI1640 2%, en TB1 2%, MBD 15% y MBDM 16%. Se observaron diferencias estadísticamente significativas después de las 24 h, entre los medios TB1, MBD y MBDM comparado con SSI. Se concluye que el medio MBDM es el que ofrece las mejores condiciones para mantener viable a Blastocystis sp por 72 h.

ABSTRACT

The protozoan Blastocystis sp is a high prevalence in Venezuela. Its role is controversial pathogen and its wide genetic variability related to the difficulty of keeping it in a position outside the host viability. We evaluated the utility of in vitro culture media RPMI1640, TB1, and MBDM MBD to maintain the vitality of Blastocystis sp. They selected 97 stool samples, 43 (44%) of which were positive for Blastocystis sp and only 15 of them were purified by gradient Blastocystis sp (ficoll-sodium diatrizaoato). In each culture medium and 0.85% saline (SSI) is inoculó1x103 parasites per patient and viability was assessed by trypan blue staining after 24, 48 and 72 hours. The results showed viability percentage at 24 hours in SSI of 2%, 5% RPMI1640 at TB1 5%, 24% and MBDM MBD 40%. After 48 h SSI 3% in RPMI1640 4%, 4% TB1, MBD MBDM 17% and 21%. After 72 h SSI 2% in RPMI1640 2%, 2% TB1, MBD 15% and 16% MBDM. Statistically significant differences were observed after 24 h, between TB1 media, compared MBDM MBD and SSI. We conclude that the medium is MBDM which offers the best conditions for maintaining viable Blastocystis sp for 72 h.